Эта табличка распространяет действие установленного: Билет 13 вопрос 4 ПДД 2020 с пояснениям

Содержание

Билет №13

- Выберите регион -Алтайский крайАмурская областьАрхангельская областьАстраханская областьБелгородская областьБрянская областьВладимирская областьВолгоградская областьВологодская областьВоронежская областьЕврейская АОЗабайкальский крайИвановская областьИркутская областьКабардино - Балкарская РеспубликаКалининградская областьКалужская областьКамчатский крайКарачаево - Черкесская РеспубликаКемеровская областьКировская областьКостромская областьКраснодарский крайКрасноярский крайКурганская областьКурская областьЛенинградская областьЛипецкая областьМагаданская областьМоскваМосква и Московская областьМурманская областьНенецкий АОНижегородская областьНовгородская областьНовосибирская областьОмская областьОренбургская областьОрловская областьПензенская областьПермский крайПриморский крайПсковская областьРеспублика АдыгеяРеспублика АлтайРеспублика БашкортостанРеспублика БурятияРеспублика ДагестанРеспублика ИнгушетияРеспублика КазахстанРеспублика КалмыкияРеспублика КарелияРеспублика КомиРеспублика КрымРеспублика Марий ЭлРеспублика МордовияРеспублика Саха (Якутия)Республика Северная ОсетияРеспублика ТатарстанРеспублика ТываРеспублика ХакасияРостовская областьРязанская областьСамарская областьСанкт-ПетербургСаратовская областьСахалинская областьСвердловская областьСевастопольСмоленская областьСтавропольский крайТаймырский АОТамбовская областьТверская областьТомская областьТульская областьТюменская областьУдмуртская РеспубликаУльяновская областьХабаровский крайХанты-Мансийский АОЧелябинская областьЧеченская РеспубликаЧувашская РеспубликаЧукотский АОЯмало-Ненецкий АОЯрославская область

- Выберите город -

Укажите свой город

- Выберите регион -Алтайский крайАмурская областьАрхангельская областьАстраханская областьБелгородская областьБрянская областьВладимирская областьВолгоградская областьВологодская областьВоронежская областьЕврейская АОЗабайкальский крайИвановская областьИркутская областьКабардино - Балкарская РеспубликаКалининградская областьКалужская областьКамчатский крайКарачаево - Черкесская РеспубликаКемеровская областьКировская областьКостромская областьКраснодарский крайКрасноярский крайКурганская областьКурская областьЛенинградская областьЛипецкая областьМагаданская областьМоскваМосква и Московская областьМурманская областьНенецкий АОНижегородская областьНовгородская областьНовосибирская областьОмская областьОренбургская областьОрловская областьПензенская областьПермский крайПриморский крайПсковская областьРеспублика АдыгеяРеспублика АлтайРеспублика БашкортостанРеспублика БурятияРеспублика ДагестанРеспублика ИнгушетияРеспублика КазахстанРеспублика КалмыкияРеспублика КарелияРеспублика КомиРеспублика КрымРеспублика Марий ЭлРеспублика МордовияРеспублика Саха (Якутия)Республика Северная ОсетияРеспублика ТатарстанРеспублика ТываРеспублика ХакасияРостовская областьРязанская областьСамарская областьСанкт-ПетербургСаратовская областьСахалинская областьСвердловская областьСевастопольСмоленская областьСтавропольский крайТаймырский АОТамбовская областьТверская областьТомская областьТульская областьТюменская областьУдмуртская РеспубликаУльяновская областьХабаровский крайХанты-Мансийский АОЧелябинская областьЧеченская РеспубликаЧувашская РеспубликаЧукотский АОЯмало-Ненецкий АОЯрославская область

- Выберите город -

Каталог автошкол

20587 городов
7498 автошколы и инструктора
46172 отзывов

- Выберите регион -Алтайский крайАмурская областьАрхангельская областьАстраханская областьБелгородская областьБрянская областьВладимирская областьВолгоградская областьВологодская областьВоронежская областьЕврейская АОЗабайкальский крайИвановская областьИркутская областьКабардино - Балкарская РеспубликаКалининградская областьКалужская областьКамчатский крайКарачаево - Черкесская РеспубликаКемеровская областьКировская областьКостромская областьКраснодарский крайКрасноярский крайКурганская областьКурская областьЛенинградская областьЛипецкая областьМагаданская областьМоскваМосква и Московская областьМурманская областьНенецкий АОНижегородская областьНовгородская областьНовосибирская областьОмская областьОренбургская областьОрловская областьПензенская областьПермский крайПриморский крайПсковская областьРеспублика АдыгеяРеспублика АлтайРеспублика БашкортостанРеспублика БурятияРеспублика ДагестанРеспублика ИнгушетияРеспублика КазахстанРеспублика КалмыкияРеспублика КарелияРеспублика КомиРеспублика КрымРеспублика Марий ЭлРеспублика МордовияРеспублика Саха (Якутия)Республика Северная ОсетияРеспублика ТатарстанРеспублика ТываРеспублика ХакасияРостовская областьРязанская областьСамарская областьСанкт-ПетербургСаратовская областьСахалинская областьСвердловская областьСевастопольСмоленская областьСтавропольский крайТаймырский АОТамбовская областьТверская областьТомская областьТульская областьТюменская областьУдмуртская РеспубликаУльяновская областьХабаровский крайХанты-Мансийский АОЧелябинская областьЧеченская РеспубликаЧувашская РеспубликаЧукотский АОЯмало-Ненецкий АОЯрославская область

- Выберите город -

- Выберите регион -Алтайский крайАмурская областьАрхангельская областьАстраханская областьБелгородская областьБрянская областьВладимирская областьВолгоградская областьВологодская областьВоронежская областьЕврейская АОЗабайкальский крайИвановская областьИркутская областьКабардино - Балкарская РеспубликаКалининградская областьКалужская областьКамчатский крайКарачаево - Черкесская РеспубликаКемеровская областьКировская областьКостромская областьКраснодарский крайКрасноярский крайКурганская областьКурская областьЛенинградская областьЛипецкая областьМагаданская областьМоскваМосква и Московская областьМурманская областьНенецкий АОНижегородская областьНовгородская областьНовосибирская областьОмская областьОренбургская областьОрловская областьПензенская областьПермский крайПриморский крайПсковская областьРеспублика АдыгеяРеспублика АлтайРеспублика БашкортостанРеспублика БурятияРеспублика ДагестанРеспублика ИнгушетияРеспублика КазахстанРеспублика КалмыкияРеспублика КарелияРеспублика КомиРеспублика КрымРеспублика Марий ЭлРеспублика МордовияРеспублика Саха (Якутия)Республика Северная ОсетияРеспублика ТатарстанРеспублика ТываРеспублика ХакасияРостовская областьРязанская областьСамарская областьСанкт-ПетербургСаратовская областьСахалинская областьСвердловская областьСевастопольСмоленская областьСтавропольский крайТаймырский АОТамбовская областьТверская областьТомская областьТульская областьТюменская областьУдмуртская РеспубликаУльяновская областьХабаровский крайХанты-Мансийский АОЧелябинская областьЧеченская РеспубликаЧувашская РеспубликаЧукотский АОЯмало-Ненецкий АОЯрославская область

- Выберите город -

Быстрый поиск автошколы

- Выберите регион -Алтайский крайАмурская областьАрхангельская областьАстраханская областьБелгородская областьБрянская областьВладимирская областьВолгоградская областьВологодская областьВоронежская областьЕврейская АОЗабайкальский крайИвановская областьИркутская областьКабардино - Балкарская РеспубликаКалининградская областьКалужская областьКамчатский крайКарачаево - Черкесская РеспубликаКемеровская областьКировская областьКостромская областьКраснодарский крайКрасноярский крайКурганская областьКурская областьЛенинградская областьЛипецкая областьМагаданская областьМоскваМосква и Московская областьМурманская областьНенецкий АОНижегородская областьНовгородская областьНовосибирская областьОмская областьОренбургская областьОрловская областьПензенская областьПермский крайПриморский крайПсковская областьРеспублика АдыгеяРеспублика АлтайРеспублика БашкортостанРеспублика БурятияРеспублика ДагестанРеспублика ИнгушетияРеспублика КазахстанРеспублика КалмыкияРеспублика КарелияРеспублика КомиРеспублика КрымРеспублика Марий ЭлРеспублика МордовияРеспублика Саха (Якутия)Республика Северная ОсетияРеспублика ТатарстанРеспублика ТываРеспублика ХакасияРостовская областьРязанская областьСамарская областьСанкт-ПетербургСаратовская областьСахалинская областьСвердловская областьСевастопольСмоленская областьСтавропольский крайТаймырский АОТамбовская областьТверская областьТомская областьТульская областьТюменская областьУдмуртская РеспубликаУльяновская областьХабаровский крайХанты-Мансийский АОЧелябинская областьЧеченская РеспубликаЧувашская РеспубликаЧукотский АОЯмало-Ненецкий АОЯрославская область

- Выберите город -

Ваш номер телефона:

Категория

A

B

C

D

E

M

Нажимая кнопку «ДАЛЕЕ», Вы соглашаетесь
с Политикой конфиденциальности сайта

Таблички Вид транспортного средства | Кроме вида транспортного средства


2 комментария

Знаки дополнительной информации (таблички) применяют для уточнения или ограничения действия других дорожных знаков, а также для сообщения участникам движения иной информации.

Следующая группа знаков дополнительной информации ПДД — таблички 8.4.1 — 8.4.8 «Вид транспортного средства» и 8.4.9 — 8.4.15 «Кроме вида транспортного средства».

Таблички 8.4.1-8.4.8 «Вид транспортного средства»

Таблички 8.4.1-8.4.8 «Вид транспортного средства» применяют для указания вида транспортного средства, на который распространяется действие знака, вместе с которым эта табличка установлена.

Таблички распространяют действие знака:

  • 8.4.1 — на грузовые автомобили, в том числе и с прицепом, разрешенной максимальной массой более 3,5 т;
  • 8.4.2 — на грузовые автомобили или тракторы с прицепом или полуприцепом любого типа, а также на транспортные средства, буксирующие механические транспортные средства;
  • 8.4.3 — на легковые автомобили, а также грузовые автомобили с разрешенной максимальной массой не более 3,5 т;
  • 8.4.3.1 — на электромобили и гибридные автомобили, имеющие возможность зарядки от внешнего источника;
  • 8.4.4 — 8.4.7 — на автобусы, тракторы, мотоциклы и велосипеды, соответственно;
  • 8.4.8 — на транспортные средства, обозначенные опознавательными знаками (информационными таблицами) «Опасный груз».

На картинке изображена комбинация знаков: 4.1.1 «Движение прямо» и таблички 8.4.1. Эта комбинация знаков означает, что грузовым автомобилям с РММ более 3,5т на ближнем пересечении разрешено движение только прямо.

 

Таблички 8.4.9 — 8.4.15 «Кроме вида транспортного средства»

Таблички 8.4.9 — 8.4.15 «Кроме вида транспортного средства» применяют для указания вида транспортного средства, на который НЕ распространяется действие знака, с которым применена табличка.

Дорожный знак, с которым применена одна из табличек 8.4.9 — 8.4.15 распространяет действие на все ТС, кроме:

  • 8.4.9 — грузовых автомобилей, в том числе и с прицепом, разрешенной максимальной массой более 3,5 т;
  • 8.4.10 — легковых автомобилей, а также грузовых автомобилей с разрешенной максимальной массой не более 3,5 т;
  • 8.4.11, 8.4.12, 8.4.13 — автобусов, мотоциклов, велосипедов, соответственно;
  • 8.4.14 — транспортных средств, используемых в качестве легкового такси.
  • 8.4.15 — электромобилей и гибридных автомобилей, имеющих возможность зарядки от внешнего источника.

На картинке изображена комбинация знаков 3.1 «Въезд запрещен» и двух табличек: 8.4.9 (кроме грузовых) и 8.4.10 (кроме легковых). Эти знаки означают, что въезд запрещен всем ТС, кроме легковых и грузовых автомобилей.

Полный список знаков дополнительной информации (табличек) с краткими пояснениями (комментариями) на сайте avtonauka.ru размещен в Приложении 1 ПДД.

Навигация по серии статей<< Таблички Зона и Направление действияТаблички 8.5.1 — 8.6.9 >>

Автор: Сергей Довженко

Последняя редакция: 28.03.2020

Если есть желание поделиться прочитанным, ниже кнопки на выбор. Жмем, не стесняемся.

Дорожные знаки. Подготовка к экзамену в ГИБДД

Разрешен ли Вам съезд на дорогу с грунтовым покрытием?

Впереди по ходу Вашего движения предупреждающий знак 1.11.2 «Опасный поворот» и знаки 1.34.2 «Направление поворота», которые указывают направление движения на закруглении дороги малого радиуса с ограниченной видимостью. Ничего, что бы Вам запрещало съезд на дорогу с грунтовым покрытием, нет. По Вашему желанию поворачиваете направо. («Дорожные знаки»).

Кому Вы обязаны уступить дорогу при повороте налево?

Перекрёсток неравнозначный. Главная дорога меняет направление. Транспортные средства, находящиеся на главной дороге, имеют преимущество, а водители между собой руководствуются «правилом правой руки». Никому не уступая, первым проезжаете Вы, вторым автобус, легковой автомобиль последним, так как он находится на второстепенной дороге. («Дорожные знаки», пункты 13.9, 13.10, 13.11 ПДД)

Можно ли Вам въехать на мост первым?

Знак 2.7 «Преимущество перед встречным движением» предоставляет Вам право первым проехать через узкий участок дороги, т. е. через мост. («Дорожные знаки», пункт 1.2 термин «Уступить дорогу»)

Разрешается ли Вам продолжить движение в прямом направлении на транспортном средстве подкатегории «С1» без прицепа?

Знак 3.4 «Движение грузовых автомобилей запрещено», при отсутствии цифры на автомобиле, распространяет свое действие на данные автомобили, в т.ч. и с прицепом, р.м.м. которых более 3,5 т. Также от действия данного знака отступают указанные ТС р.м.м. которых величиной до 26 т без прицепа, и они в этом случае обслуживают предприятия, находящиеся в обозначенной знаком зоне. Данное правило распространяется и на ТС подкатегории С1, т.к. их р.м.м. не превышает 7,5 т. («Дорожные знаки» ст. 25 п.1 ФЗ «О безопасности дорожного движения»)

Что запрещено в зоне действия этого знака?

Знак 5.33 «Пешеходная зона» обозначает место, с которого начинается территория (участок дороги), на которой разрешено движение только пешеходов и приравненных к ним лиц (это передвигающиеся в инвалидных колясках без двигателя, ведущие велосипед, мопед, мотоцикл, везущие санки, тележку, детскую и инвалидную коляску), а также велосипедистов в случаях, установленных в пунктах 24.2 - 24.4 ПДД. Въезд в обозначенную зону и, соответственно, движение в ней любых механических транспортных средств запрещено. («Дорожные знаки», термин «Пешеход» п. 1.2 ПДД).

Где Вы должны остановиться?

В случае установки знака 2.5 «Движение без остановки запрещено» непосредственно перед пересечением проезжих частей водитель обязан остановиться у стоп-линии. При её отсутствии (как в данном случае) водитель обязан остановиться перед границей проезжих частей, т.е. не заезжая за линию «В». Имейте в виду, что такие места опасны, часто находятся «под особым контролем» инспекторов ГИБДД. Поэтому всегда выполняйте главное условие - обязательную остановку. Это избавит Вас от конфликтной ситуации и сохранит Вашу собственную безопасность. («Дорожные знаки»)

Можно ли Вам остановиться в этом месте для посадки или высадки пассажиров?

В данном случае место остановки маршрутных транспортных средств обозначено соответствующим знаком и жёлтой зигзагообразной разметкой 1.17. Остановка в указанном месте допускается, если Вы произведёте ее для посадки или высадки пассажиров и в это время не создадите помех движению маршрутных транспортных средств. («Дорожные знаки», «Горизонтальная разметка», пункт 12.4 ПДД)

Кому Вы обязаны уступить дорогу при повороте налево?

Перекрёсток неравнозначный. Главная дорога меняет направление. Транспортные средства, находящиеся на главной дороге, имеют преимущество; между собой безрельсовые транспортные средства руководствуются «правилом правой руки», уступая трамваю, имеющему преимущество в равнозначных условиях. Трамвай «А» проезжает первым, Вы после него. Легковой автомобиль и трамвай «Б» одновременно, так как их траектории не пересекаются. («Дорожные знаки», пункты 13.9, 13.10, 13.11 ПДД)

Эти знаки предупреждают Вас:

Табличка 8.2.1 «Зона действия» указывает протяженность ряда опасных поворотов, первый из которых - налево - начинается через 150 - 300 м. («Дорожные знаки» 8.2.1, 1.12.2)

Вы буксируете неисправный автомобиль. По какой полосе Вам можно продолжить движение в населенном пункте?

По ходу Вашего движения установлен знак 5.15.3 «Начало полосы». По основной полосе знаком 4.6 «Ограничение минимальной скорости» введено ограничение - минимальная скорость должна быть не менее 60 км/ч. Водитель, который не может продолжать движение с указанной скоростью, должен перестроиться на правую полосу. Буксирующим механическим ТС разрешается движение со скоростью не более 50 км/ч. Вам следует продолжать движение только по правой полосе. («Дорожные знаки», пункт 10.4 ПДД)

При наличии какого знака водитель должен уступить дорогу, если встречный разъезд затруднен?

На уклонах, обозначенных знаками: «А» - 1.13 «Крутой спуск» и «Б» - 1.14 «Крутой подъем» - при наличии препятствия уступить дорогу должен водитель транспортного средства, двигающегося на спуск. На узких участках дороги, где встречный разъезд затруднён, устанавливают знаки: с одной стороны - «В» - 2.6 «Преимущество встречного движения», с другой стороны движения - «Г» -2.7 «Преимущество перед встречным движением». В данном случае при затруднённом встречном разъезде запрещается въезд на узкий участок дороги со стороны знака 2.6. Ответ - знаки «А» и «В». («Дорожные знаки»)

Разрешена ли Вам стоянка в указанном месте?

Действие знака 3.27 «Остановка запрещена» распространяется от места установки до ближайшего перекрёстка, а при отсутствии перекрестка - до конца населённого пункта. В данном случае до знака 5.24.1 «Конец населённого пункта». Вы имеете право остановиться на обочине за знаком. («Дорожные знаки»)

Нарушил ли водитель грузового автомобиля правила стоянки?

На околотротуарную стоянку, обозначенную знаками 6.4 «Парковка (парковочное место)» и 8.6.4 «Способ постановки транспортного средства на стоянку» можно поставить указанным способом только легковой автомобиль или мотоцикл. Грузовым автомобилям, независимо от их р.м.м. стоянка в данном месте не допускается. Данный водитель нарушил Правила. Не путайте табл. 8.6.4 «Способ постановки ТС на стоянку» с табл. 8.4.3 «Вид транспортного средства», иначе допустите ошибку. («Дорожные знаки»)

Как Вам следует поступить при повороте налево?

Перекрёсток неравнозначный. Главная дорога меняет направление. Проблесковый маячок жёлтого цвета на грузовике преимущество не предоставляет. Преимущество имеют транспортные средства, находящиеся на главной дороге. Вы проезжаете первым, после Вас проезжают автомобили, находящиеся на второстепенной дороге, которые между собой руководствуются «правилом правой руки». Легковой автомобиль проедет вторым, грузовик - последним. (Пункты 3.4, 13.9, 13.10, 13.11 ПДД)

Вам разрешено продолжить движение:

Знак 3.18.2 «Поворот налево запрещён» не запрещает производить разворот. Поэтому можете по своему усмотрению продолжить движение прямо или развернуться, и продолжить движение в обратном направлении. («Дорожные знаки»)

Какие из указанных знаков разрешают проезд на автомобиле к месту проживания или работы?

Разрешают проезд на автомобиле к месту проживания или работы знаки: «А» - 3.2 «Движение запрещено», «В» - 3.3 «Движение механических транспортных средств запрещено». Из запрещающих знаков 6 знаков предоставляют такую «льготу». В их число не входит знак «Б» - 3.1 «Въезд запрещён», который запрещает въезд под знак всех ТС, кроме маршрутных транспортных средств. («Дорожные знаки»)

Что обозначают эти дорожные знаки?

Знак 6.4 «Парковка (парковочное место)» применён с табличкой 8.21.2 «Вид маршрутного транспортного средства». Такое сочетание знаков показывает, что с этого места для дальнейшего движения можно воспользоваться маршрутными транспортными средствами - автобусом или троллейбусом, а свой автомобиль можно оставить на оборудованной стоянке. («Дорожные знаки»)

О чем информируют Вас эти дорожные знаки?

Табличка 8.1.2 «Расстояние до объекта» указывает расстояние от знака 2.4 «Уступите дорогу» до перекрёстка в случае, если непосредственно перед перекрёстком установлен знак 2.5 «Движение без остановки запрещено». («Дорожные знаки»)

Тема ПДД ABM 07. Дорожные знаки. Что обозначают прерывистые...

Тема ПДД ABM 07. Дорожные знаки. Что обозначают прерывистые...

Идет подготовка вопросов, подождите...

Вопросы случайно: Ответы случайно: Кнопка подтверждения: 

ABM 00:00

Разрешен ли Вам съезд на дорогу с грунтовым покрытием?

1. Разрешен.

2. Разрешен только при технической неисправности транспортного средства.

3. Запрещен.

Ответ выбран Далее

Какие из указанных знаков запрещают движение водителям мопедов?

1. Только А.

2. Только Б.

3. В и Г.

4. Все.

Ответ выбран Далее

С какой скоростью Вы можете продолжить движение вне населенного пункта по левой полосе на легковом автомобиле?

1. Не более 50 км/ч.

2. Не менее 50 км/ч и не более 70 км/ч.

3. Не менее 50 км/ч и не более 90 км/ч.

Ответ выбран Далее

Кому Вы обязаны уступить дорогу при повороте налево?

1. Только автобусу.

2. Только легковому автомобилю.

3. Никому.

Ответ выбран Далее

Можно ли Вам въехать на мост первым?

1. Можно.

2. Можно, если Вы не затрудните движение встречному автомобилю.

3. Нельзя.

Ответ выбран Далее

Разрешено ли Вам произвести остановку для посадки пассажира?

1. Разрешено.

2. Разрешено только по четным числам месяца.

3. Разрешено только по нечетным числам месяца.

4. Запрещено.

Ответ выбран Далее

Что запрещено в зоне действия этого знака?

1. Движение любых транспортных средств.

2. Движение всех транспортных средств со скоростью не более 20 км/ч.

3. Движение механических транспортных средств.

Ответ выбран Далее

Где Вы должны остановиться?

1. Перед знаком (А).

2. Перед перекрестком (Б).

3. Перед краем пересекаемой проезжей части (В).

Ответ выбран Далее

Вам необходимо двигаться со скоростью не более 40 км/ч:

1. Только во время дождя.

2. Во время выпадения осадков (дождя, града, снега).

3. Во всех случаях, когда покрытие проезжей части влажное.

Ответ выбран Далее

Какой из указанных знаков устанавливается в начале дороги с односторонним движением?

1. Только А.

2. Только Б.

3. Б или Г.

4. Б или В.

Ответ выбран Далее

Кому Вы обязаны уступить дорогу при повороте налево?

1. Трамваям А и Б.

2. Трамваю А и легковому автомобилю.

3. Только трамваю А.

4. Никому.

Ответ выбран Далее

Эти знаки предупреждают Вас:

1. О наличии через 500 м опасных поворотов.

2. О том, что на расстоянии 150 – 300 м за дорожным знаком начнется участок дороги протяженностью 500 м с опасными поворотами.

3. О том, что сразу за знаком начнется участок протяженностью 500 м с опасными поворотами.

Ответ выбран Далее

Какой из указанных знаков распространяет свое действие только на ту полосу, над которой он установлен?

1. Только А.

2. Только Б.

3. Б и В.

Ответ выбран Далее

Вы буксируете неисправный автомобиль. По какой полосе Вам можно продолжить движение в населенном пункте?

1. Только по правой.

2. Только по левой.

3. По любой.

Ответ выбран Далее

Разрешена ли Вам стоянка в указанном месте?

1. Разрешена.

2. Разрешена только в светлое время суток.

3. Запрещена.

Ответ выбран Далее

Нарушил ли водитель грузового автомобиля правила стоянки?

1. Нарушил.

2. Не нарушил, если разрешенная максимальная масса автомобиля не более 3,5 т.

3. Не нарушил.

Ответ выбран Далее

В каких направлениях Вам можно продолжить движение по левой полосе на грузовом автомобиле с разрешенной максимальной массой не более 3,5 т?

1. Только прямо.

2. Прямо и направо.

3. Прямо, налево и в обратном направлении.

Ответ выбран Далее

Кто из водителей нарушил правила стоянки?

1. Оба.

2. Только водитель автомобиля А.

3. Только водитель автомобиля Б.

4. Никто не нарушил.

Ответ выбран Далее

Как Вам следует поступить при повороте налево?

1. Проехать перекресток первым.

2. Уступить дорогу только грузовому автомобилю с включенным проблесковым маячком.

3. Уступить дорогу обоим транспортным средствам.

Ответ выбран Далее

Вам разрешено продолжить движение:

1. Только прямо.

2. Прямо или в обратном направлении.

3. Во всех направлениях.

Ответ выбран Далее

Какие из указанных знаков разрешают проезд на автомобиле к месту проживания или работы?

1. Только А.

2. Только В.

3. А и В.

4. Все.

Ответ выбран Далее

Что обозначают эти дорожные знаки?

1. Парковочное место только для автобусов.

2. Парковочное место для автобусов и троллейбусов.

3. Парковочное место, где возможна пересадка на маршрутное транспортное средство (автобус или троллейбус).

Ответ выбран Далее

О чем информируют Вас эти дорожные знаки?

1. О приближении к перекрестку, где установлен знак «Уступите дорогу».

2. О приближении к перекрестку, где установлен знак «Движение без остановки запрещено».

3. О приближении к таможне.

Ответ выбран Далее

Разрешено ли Вам произвести остановку в указанном месте?

1. Разрешено.

2. Разрешено только для посадки или высадки пассажиров.

3. Запрещено.

Ответ выбран Далее

Действие каких знаков из указанных распространяется только до ближайшего по ходу движения перекрестка?

1. А и В.

2. Б и Г.

3. В и Г.

Ответ выбран Далее

Вы намерены продолжить движение прямо. Кому Вы обязаны уступить дорогу?

1. Только мотоциклу.

2. Мотоциклу и легковому автомобилю.

3. Никому.

Ответ выбран Далее

В чем особенность скоростного режима на этом участке дороги?

1. Рекомендуемая скорость движения – 40 км/ч.

2. Минимальная допустимая скорость движения – 40 км/ч.

3. Минимальная допустимая скорость движения по левой полосе – 40 км/ч.

Ответ выбран Да

Правильные ответы экзамена ПДД 2020 онлайн

Заметили ошибку? Напишите нам об этом.

Для быстрого перехода к нужному ответу выберите его в таблице ниже.

Вопрос 1

Нарушает ли водитель Правила, двигаясь посередине дороги?

1. Не нарушает.

2. Не нарушает, если отсутствуют встречные транспортные средства.

3. Нарушает.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 3

Вопрос 2

Как следует поступить, если вам необходимо развернуться?

1. Развернуться на этом перекрестке при отсутствии на нем других транспортных средств.

2. Проехать прямо и развернуться за перекрестком.

3. Проехать прямо и развернуться только на следующем перекрестке.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 3

Разрешена ли вам стоянка в указанном месте?

1. Да.

2. Нет.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 4

Эта табличка распространяет действие установленного с ней знака:

1. Только на легковые автомобили.

2. На легковые автомобили, а также на грузовые автомобили с разрешенной максимальной массой до 3,5 т.

3. На легковые автомобили и мотоциклы.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 5

В каком из указанных мест вы можете пересечь сплошную линию разметки и остановиться?

1. Только Б.

2. В любом.

3. Ни в одном.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 1

Вопрос 6

Ваши действия в данной ситуации?

1. Проехать переезд.

2. Остановиться перед переездом.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 1

Вопрос 7

Когда может быть прекращена подача сигнала рукой о повороте?

1. Непосредственно перед началом маневра.

2. Только после окончания маневра.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 1

Вопрос 8

С какой полосы вы можете въехать на данный перекресток?

1. Только с правой.

2. С правой или левой.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 9

Разрешен ли вам разворот на указанном участке дороги?

1. Разрешен.

2. Разрешен только при видимости дороги более 100 м.

3. Не разрешен.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 10

С какой максимальной скоростью вы можете продолжить движение на легковом автомобиле?

1. 60 км/ч.

2. 70 км/ч.

3. 90 км/ч.

4. 110 км/ч.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 3

Вопрос 11

Разрешен ли вам обгон сразу трех транспортных средств после проезда пешеходного перехода?

1. Запрещен.

2. Разрешен.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 12

Можете ли вы остановиться на мосту для посадки пассажира?

1. Да.

2. Нет.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 13

Вы намерены проехать перекресток в прямом направлении. Ваши действия?

1. Проедете перекресток первым.

2. Уступите дорогу трамваю.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 14

Кто из водителей должен уступить дорогу пешеходам?

1. Только водитель легкового автомобиля.

2. Только водитель грузового автомобиля.

3. Оба водителя.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 3

Вопрос 15

Вы намерены повернуть налево. Можете ли вы приступить к повороту?

1. Да.

2. Да, но не создавая помех грузовому автомобилю.

3. Нет.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 16

Разрешено ли вам продолжить движение по правой полосе?

1. Разрешено, если скорость грузового автомобиля менее 30 км/ч.

2. Разрешено, если при этом не будет создано помех движению маршрутных транспортных средств.

3. Запрещено.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 3

Вопрос 17

Вы можете использовать задние противотуманные фонари:

1. Только в условиях недостаточной видимости.

2. Только при движении в темное время суток.

3. В обоих перечисленных случаях.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 1

Вопрос 18

При возникновении какой неисправности вам запрещено дальнейшее движение даже до места ремонта или стоянки?

1. Не работает стеклоподъемник.

2. Неисправно рулевое управление.

3. Неисправен глушитель.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 19

Двигаясь в прямом направлении со скоростью 60 км/ч, вы внезапно попали на небольшой участок скользкой дороги. Что следует предпринять?

1. Плавно затормозить.

2. Не менять траектории и скорости движения.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Вопрос 20

На какой срок может быть наложен кровоостанавливающий жгут?

1. Не более получаса в теплое время года и не более одного часа в холодное время года.

2. Не более одного часа в теплое время года и не более получаса в холодное время года.

3. Время не ограничено.

Вы пропустили это задание.
Правильный ответ: 2

Заметили ошибку? Напишите нам об этом.

Симптомы, признаки и побочные эффекты тревоги

Тревога может влиять на физическое и психическое здоровье. Есть краткосрочные и долгосрочные эффекты как на разум, так и на тело.

В то время как многие люди знают о влиянии тревожности на психическое здоровье, меньше людей знают о физических побочных эффектах, которые могут включать проблемы с пищеварением и повышенный риск заражения. Беспокойство также может изменить функцию сердечно-сосудистой, мочевыделительной и дыхательной систем.

В этой статье мы обсудим наиболее частые физические симптомы и побочные эффекты тревоги.

Люди с тревогой могут испытывать ряд физических и психологических симптомов. К наиболее распространенным относятся:

  • нервозность, напряжение или страх
  • беспокойство
  • приступы паники, в тяжелых случаях
  • учащенное сердцебиение
  • учащенное дыхание или гипервентиляция
  • потливость
  • дрожь
  • усталость
  • слабость
  • головокружение
  • трудности с концентрацией внимания
  • проблемы со сном
  • тошнота
  • проблемы с пищеварением
  • ощущение слишком холодного или слишком горячего
  • боли в груди

Некоторые тревожные расстройства имеют дополнительные симптомы.Например, ОКР также вызывает:

  • навязчивых мыслей
  • компульсивное поведение, направленное на снижение тревожности, вызванной мыслями
  • периоды временного облегчения, которые следуют за компульсивным поведением

Тревога может оказывать значительное влияние на тело , а длительное беспокойство увеличивает риск развития хронических физических состояний.

Медицинское сообщество подозревает, что тревога развивается в миндалевидном теле, области мозга, которая управляет эмоциональными реакциями.

Когда человек испытывает беспокойство, стресс или страх, мозг посылает сигналы другим частям тела. Сигналы сообщают, что тело должно готовиться к бою или бежать.

Организм отвечает, например, высвобождением адреналина и кортизола, которые многие называют гормонами стресса.

Реакция «бей или беги» полезна при столкновении с агрессивным человеком, но менее полезна при собеседовании при приеме на работу или проведении презентации. Кроме того, длительное время такой ответ не является здоровым.

Некоторые из способов, которыми тревога влияет на организм:

Дыхание и респираторные изменения

В периоды тревоги дыхание человека может стать частым и поверхностным, что называется гипервентиляцией.

Гипервентиляция позволяет легким поглощать больше кислорода и быстро переносить его по телу. Дополнительный кислород помогает организму подготовиться к драке или бежать.

Гипервентиляция может вызывать у людей ощущение, что они не получают достаточно кислорода, и они могут задыхаться.Это может усугубить гипервентиляцию и ее симптомы, в том числе:

  • головокружение
  • ощущение дурноты
  • головокружение
  • покалывание
  • слабость

реакция сердечно-сосудистой системы

беспокойство может вызвать изменения частоты сердечных сокращений и кровообращения во всем тело.

Более высокая частота сердечных сокращений облегчает бегство или сражение, а усиление кровотока приносит в мышцы свежий кислород и питательные вещества.

Когда кровеносные сосуды сужаются, это называется сужением сосудов и может влиять на температуру тела.Люди часто испытывают приливы в результате сужения сосудов.

В ответ тело потеет, чтобы остыть. Иногда это может быть слишком эффективным и вызывать у человека холод.

Длительное беспокойство может быть вредным для сердечно-сосудистой системы и здоровья сердца. Некоторые исследования показывают, что тревожность увеличивает риск сердечных заболеваний у здоровых людей.

Нарушение иммунной функции

В краткосрочной перспективе тревога усиливает реакцию иммунной системы.Однако длительное беспокойство может иметь обратный эффект.

Кортизол предотвращает высвобождение веществ, вызывающих воспаление, и отключает аспекты иммунной системы, которые борются с инфекциями, нарушая естественный иммунный ответ организма.

Люди с хроническими тревожными расстройствами более подвержены простуде, гриппу и другим видам инфекций.

Изменения в пищеварительной функции

Кортизол блокирует процессы, которые организм считает несущественными в ситуации борьбы или бегства.

Один из таких заблокированных процессов - переваривание. Также адреналин снижает кровоток и расслабляет мышцы живота.

В результате у человека, страдающего тревогой, может возникнуть тошнота, диарея и ощущение вздутия желудка. Они также могут потерять аппетит.

Некоторые исследования показывают, что стресс и депрессия связаны с рядом заболеваний пищеварительной системы, включая синдром раздраженного кишечника (СРК).

Одно исследование с участием амбулаторных пациентов гастроэнтерологической клиники в Мумбаи показало, что 30-40 процентов участников с СРК также страдали тревогой или депрессией.

Реакция мочеиспускания

Беспокойство и стресс могут усилить потребность в мочеиспускании, и эта реакция чаще встречается у людей с фобиями.

Потребность в мочеиспускании или потеря контроля над мочеиспусканием может иметь эволюционную основу, так как с пустым мочевым пузырем легче бежать.

Однако связь между тревогой и учащенным позывом к мочеиспусканию остается неясной.

Беспокойство может привести к долгосрочным негативным последствиям. Люди с тревогой могут испытывать:

  • депрессия
  • проблемы с пищеварением
  • бессонница
  • хронические болевые состояния
  • трудности в учебе, работе или общении
  • потеря интереса к сексу
  • расстройства, связанные с токсикоманией
  • суицидальные мысли

Медицинскому сообществу еще предстоит определить причину беспокойства, но несколько факторов могут способствовать ее развитию.Причины и факторы риска могут включать:

  • травматический жизненный опыт
  • генетические особенности
  • заболевания, такие как сердечные заболевания, диабет или хронические болевые состояния
  • использование лекарств
  • секс, поскольку женщины чаще испытывают беспокойство, чем мужчины
  • злоупотребление психоактивными веществами
  • постоянный стресс из-за работы, финансов или семейной жизни
  • наличие других психических расстройств

Чтобы поставить диагноз, врач оценит симптомы и проверит наличие каких-либо основных заболеваний, которые могут вызывать тревогу .

Диагноз будет зависеть от типа тревожного расстройства, которое, по-видимому, есть у человека. В Руководстве по диагностике и статистике психических расстройств , пятое издание (DSM – 5) приведены критерии, которые могут помочь выявить проблемы и принять решение о соответствующем лечении.

Беспокойство хорошо поддается лечению, и врачи обычно рекомендуют комбинацию из следующих:

  • лекарств
  • терапии
  • групп поддержки
  • изменения образа жизни, включая физическую активность и медитацию

Врач может посоветовать вам консультацию. -на один или в группе.Когнитивно-поведенческая терапия - это одна из стратегий, которая может помочь человеку увидеть события и переживания по-другому.

Тревога описывает группу расстройств, вызывающих беспокойство, нервозность и страх. Эти чувства тревоги мешают повседневной жизни и непропорциональны вызывающему объекту или событию.

В некоторых случаях люди не могут определить триггер и испытывают тревогу по тому, что кажется беспричинным.

Хотя в некоторых ситуациях можно ожидать легкого беспокойства, например перед важной презентацией или встречей, постоянное беспокойство может мешать благополучию человека.

По данным Американской ассоциации тревоги и депрессии, тревожные расстройства представляют собой наиболее распространенное психическое заболевание в Соединенных Штатах и ​​ежегодно поражают 40 миллионов взрослых в стране.

Хотя эти расстройства хорошо поддаются лечению, но только 36,9 процента людей с тревожным расстройством получают лечение.

Типы тревожных расстройств включают:

  • Генерализованное тревожное расстройство - чрезмерное беспокойство без видимой причины, которое длится 6 месяцев или дольше
  • Социальная тревога - страх осуждения или унижения в социальных ситуациях
  • Разлука - страх оказаться вдали от дома или семьи
  • Фобия - боязнь определенной деятельности, объекта или ситуации
  • Ипохондрия - постоянный страх серьезных проблем со здоровьем
  • Обсессивно-компульсивное расстройство (ОКР) - повторяющиеся мысли, которые вызывают определенное поведение
  • Посттравматическое стрессовое расстройство - сильная тревога после травматического события или событий

Тревога является наиболее распространенным психическим расстройством в США.S. Это вызывает как физические, так и психологические симптомы и может быть очень неприятным.

Длительное беспокойство увеличивает риск физических заболеваний и других состояний психического здоровья, таких как депрессия.

Однако тревога очень хорошо поддается лечению. Большинство людей, получающих лечение, хорошо выздоравливают и могут наслаждаться хорошим качеством жизни.

SAAWR: Самодоступный ресурс по академическому письму

В этой теме основное внимание уделяется тому, как сформулировать цель вашего исследования и вопросы исследования, когда вы продолжаете представлять свой собственный проект.Проверьте свое понимание темы, выполнив упражнения с самопроверкой на следующей вкладке.


С указанием цели исследования

После того, как пробел в исследованиях был выявлен, пора автору представить предлагаемое исследование. Обычно это делается путем изложения общей цели исследования или объяснения того, что делается для устранения пробелов в исследовании.

Примеры:

Вот несколько примеров « заявлений о целях », найденных в исследовательских статьях и предложениях:

  1. В этом исследовании мы предлагаем и проиллюстрируем структуру для высокочастотной оценки условий ведения бизнеса (Aruoba, Diebold, & Scotti, 2008) (Бизнес).
  2. Данное исследование преследует двоякую цель. Наша первая мотивация - предложить новую аналитическую стратегию для явного учета эндогенности любой меры адаптации к климату. Наша вторая мотивация - оценить, в какой степени адаптация моделирования явно влияет на частичные эффекты климатических атрибутов (Chatzopoulos & Lippert, 2015) (Economics).
  3. Этот документ призван предложить новый взгляд на влияние зеленых технологий и инноваций на SCM ( ссылки ), чтобы достичь лучшего понимания стратегий и политики, разработанных для решения возникающих проблем в… (Cosimato & Troisi, 2015) (Экономика).

На каком языке авторы объявляют цель своего обучения?


Вопросы для исследования

Как и в случае с большинством журнальных статей, за формулировкой цели часто следует формулировка так называемых исследовательских вопросов (RQ) - заявлений (1-5) в форме вопросов, которые позволяют автор, чтобы определить фокус исследования и зафиксировать конкретные (и новые!) моменты, требующие изучения.Формулирование RQ часто считается одним из ключевых начальных шагов исследовательского проекта, этапом, который будет направлять исследовательский процесс. Однако они могут корректироваться по мере развития проекта и появления новых, часто неожиданных результатов.

Написание эффективных RQ может стать проблемой для начинающих исследователей. RQ должны быть узкими и достаточно конкретными, чтобы отвечать за них в текущих условиях. Если они слишком общие или сложные (например, «Как технологии влияют на модели голосования российских граждан?»), RQ могут дезориентировать автора относительно того, в чем фокус исследования, с чего начать исследование, какие методы и процедуры использовать, и как интерпретировать результаты.На такие вопросы, возможно, никогда не удастся найти ответы, поскольку будет довольно сложно провести соответствующее исследование без предварительного определения того, какие технологии используются, какой период времени задействован, о каком проценте российских избирателей мы думаем, как получить доступ к голосованию. данные и т. д.?

Примеры:

Выписка 1

Целью данного исследования является изучение того, как использование конкретных текстовых переменных может способствовать различному восприятию говорящего на англоязычном CMC.Я также хочу изучить возможность того, что текстовые подсказки могут способствовать восприятию других личных характеристик, таких как раса, использование Интернета и уровень образования. С этой целью в данном исследовании будут рассмотрены следующие исследовательские вопросы:

  • Как испытуемые воспринимают возраст, пол и другие характеристики говорящих в соответствии со стандартными или нестандартными орфографическими особенностями?
  • Некоторые орфографические особенности более заметны, чем другие?
  • Имеет ли значение предполагаемый возраст или пол говорящего для восприятия испытуемыми вариаций текста? (LIN.G1.06.2, MICUSP) (Прикладная лингвистика)

Выписка 2

Мы также сочли полезным изучить, какая разница может зависеть от уровня подготовки писателя. Следовательно, вопросы нашего исследования были следующими: 1) Какие виды неуправляемой обратной связи на английском языке дают студенты тайваньских университетов в интерактивном режиме на английские сочинения неизвестных коллег с помощью ресурса Web 2.0? 2) Их отзывы различаются в зависимости от уровня владения письмом, демонстрируемого в композициях? (Chwo, 2015) (Прикладная лингвистика)

Выписка 3

В частности, исследование сосредоточено на следующих исследовательских вопросах: 1) Как студенты второго уровня участвуют в процессе совместного написания текста с помощью веб-инструментов обработки текста? 2) Какова природа группового участия в совместном письме через Интернет? (Кесслер и др., 2012) (Прикладная лингвистика).

Если вы определили пробел в исследовании на данном этапе, как бы вы сформулировали цель своего исследования и начальные вопросы исследования?

Границы | Изучение влияния механической стимуляции на спонтанную активность ганглиозных клеток сетчатки

Введение

Эукариотические клетки постоянно подвергаются биомеханическому взаимодействию с внеклеточной средой. Механические силы играют фундаментальную роль во многих различных аспектах рождения, жизни и смерти клеток.Начиная со стволовых клеток, внешние силы и механические ограничения окружающей среды жизненно важны для запуска процесса дифференцировки и определения судьбы клеток как в эмбриональном развитии (Vogel and Sheetz, 2006; Reilly and Engler, 2010; Yim and Sheetz, 2012), так и во взрослом возрасте (Vining and Mooney, 2017) с беспрецедентными возможностями разработки биомеханических методов лечения регенерации тканей in vivo . Не только отдельные клетки, но и целые органы, например сердце (Terracio et al., 1988; Франц и др., 1989; Kohl et al., 2006) и легкие (Wirtz and Dobbs, 2000) сильно подвержены механическим силам, которые могут изменять их клеточную организацию, структуру, функциональность и электрофизиологическую передачу сигналов.

Кроме того, биомеханические силы, действующие на клетки головного мозга, также оказывают важное, но частично изученное влияние на физиологическое развитие и функциональное поведение цепей мозга (Barnes et al., 2017). Нейроны и глиальные клетки воплощены в мозговых цепях и по своей сути воспринимают физические сигналы, обусловленные окружающим их физическим миром, которые включают, среди прочего, электрохимические градиенты и механические напряжения (Tyler, 2012; Franze, 2018).На клеточном уровне механотрансдукция может влиять на несколько клеточных процессов в головном мозге, включая дифференциацию, выживание, пролиферацию и миграцию, тем самым внося вклад в его физиологическое или патофизиологическое развитие (Ingber, 2003). Роль клеточной механотрансдукции также была связана с клеточными и субклеточными повреждениями, которые в конечном итоге могут привести к распространению патологического повреждения при черепно-мозговой травме (Hemphill et al., 2015). Кроме того, биомеханические силы участвуют в складчатости коры головного мозга, а также в аномалиях складывания при нарушениях нервного развития мозга.

Таким образом, выяснение функциональной роли биомеханических сил в мозговых цепях является важной темой исследования в нейробиологии. Однако исследование контактных сил (например, сдвига, сжатия или растяжения) в модуляции физиологических функций мозгового контура требует технического прогресса. В этом направлении мы предлагаем экспериментальную платформу для исследования электрофизиологических эффектов контролируемых контактных сил в цепях мозга с беспрецедентным разрешением. Этот метод предлагает уникальную возможность исследовать влияние механической стимуляции на электрофизиологическую активность нейрональной ткани, такой как сети клеточных культур, срезы мозга и образцы сетчатки, с разрешением одной клетки и на широком участке биологической ткани.Чтобы продемонстрировать зондирование этой техники, здесь мы исследовали влияние контактной силы на электрофизиологические реакции на зрительные стимулы в сетчатке эксплантированных мышей.

Сетчатка - это светочувствительная ткань, предназначенная для преобразования и предварительной обработки изменений интенсивности света в последовательности импульсов, которые декодируются нижележащими областями мозга для создания визуального восприятия. Хотя светочувствительные свойства сетчатки широко изучаются, поскольку они представляют собой главную и фундаментальную характеристику ткани, ее механические и механочувствительные свойства в настоящее время недостаточно изучены.Однако сетчатка постоянно подвергается механическим нагрузкам, вызванным внутриглазным давлением, всасывающими силами, тянущими внешнюю поверхность сетчатки (Marmor, 1993), и инерционными силами, прилагаемыми стекловидным телом при физических ударах, травмах или быстрых движениях глаз / головы. (Wygnanski-Jaffe et al., 2007). Механические силы, такие как растяжение, гидростатическое давление, сдвиг, растяжение, сжатие и скручивание, дают клеткам важные сигналы об окружающем физическом мире и в конечном итоге влияют на жизнеспособность клеток.В частности, в контексте сетчатки такие патологии, как осевая миопия и глаукома, могут возникать в результате длительного механического стресса (Bonomi et al., 2001; Tan et al., 2006).

Интересно, что для того, чтобы справиться с механическим сигналом и преобразовать его, некоторые популяции клеток сетчатки мыши, такие как клетки Мюллера, ганглиозные клетки сетчатки (RGC) и фоторецепторы, оснащены механорецепторами (Sappington et al., 2015) - семейством механически управляемых ионов. каналы активируются сигнальным давлением или тяговыми силами.Дефектная или нарушенная активность этих каналов оказывает функциональное влияние на физиологию сетчатки, влияя на прием и интеграцию синаптических сигналов (Manivannan and Suresh, 2012), включая клиренс K + клеток Мюллера (Skatchkov et al., 2006). Присутствие таких рецепторов предполагает, что сетчатка может собирать сенсорную информацию, не ограничиваясь визуальной сценой, но также отражая текущее состояние ткани (Križaj, 2016). Действительно, повышенное внутриглазное давление регулирует возбудимость RGC (Ryskamp et al., 2011). Кроме того, механическая стимуляция клеток Мюллера - основной популяции астроцитов в сетчатке - индуцирует волны кальция (Agte et al., 2017), которые модулируют ответную реакцию RGC на циклы белого / черного вспышек в сетчатке мышей (Munsaka et al., 2009). ) и, как известно, чувствительны к механическому растяжению (Lindqvist et al., 2010). Кроме того, в основном исследовании Grüsser et al. (1989) сообщили об индукции фосфенов (то есть о восприятии изменений интенсивности света при отсутствии визуальной стимуляции) при приложении физического давления посредством растягивания кошачьих глазных яблок.В частности, после латентного периода 0,2–4,0 с механическая стимуляция активировала включенные RGC и ингибировала выключенные RGC в течение временного окна стимуляции и определяла переходные ответы в субпопуляции включенных RGC при сбросе давления.

Аналогичным образом, использование механочувствительных свойств сетчатки недавно было предложено в качестве нового технологического подхода для протезирования (Rountree et al., 2018). Действительно, было показано, что механические стимулы, индуцированные импульсами физиологического раствора, вводимого во внутренний слой сетчатки крысы, могут вызывать локальные ответы RGC с амплитудой и латентностью, сравнимыми с наблюдаемыми при прямой световой стимуляции, даже в сетчатке с дегенерированными фоторецепторами.Наконец, в экспериментах с микроэлектроретинограммами (microERG) приложение дополнительного веса к сетчатке для улучшения связи между RGC и электродами повлияло на реакцию на полнопольные вспышки, хотя и незначительно (Fujii et al., 2016).

Чтобы выделить механочувствительные особенности, которые могут влиять на кодирование зрительной информации в цепи сетчатки, в наших экспериментах мы механически стимулировали сетчатку с микрометрической точностью со стороны слоя фоторецепторов и одновременно регистрировали пиковую активность тысяч RGC на панретинале. шкала.Для этого мы объединили датчик силы с контролируемой глубиной с многоэлектродной решеткой высокой плотности (HD-MEAs), чтобы регистрировать пиковую активность внеклеточных RGC при механической стимуляции фоторецепторов. Электрофизиологическая система сбора данных обеспечивает субмиллисекундные записи с сетки 64 × 64, состоящей из электродов с интервалом 42 мкм, покрывающих площадь 2,67 мм × 2,67 мм, что сопоставимо с протяженностью сетчатки глаза мыши.

Одновременное использование этих двух технологий позволяет проводить систематические исследования по двум взаимосвязанным темам: с одной стороны, механические свойства сетчатки могут быть охарактеризованы с помощью микроиндентирования тканей; с другой стороны, наш подход может выявить, как локализованная механическая стимуляция фоторецепторного слоя может запускать или влиять на спонтанную активность RGCs, т.е.е., выходные нейроны сетчатки. Мы представляем здесь впервые механическую характеристику ткани сетчатки с контролируемой глубиной, которая подтверждает и расширяет работу Franze et al. (2011), подчеркнув вязкоупругую природу образца. Мы также демонстрируем, что при определенных условиях вдавливания механическая стимуляция может вызывать реакцию в подмножестве RGC, предполагая, что сетчатка интегрирует эффекты биомеханических сил при кодировании визуальных входов.

Материалы и методы

Заявление об этике

Все эксперименты проводились в соответствии с руководящими принципами, установленными Советом Европейского сообщества (Директива 2010/63 / EU от 22 сентября 2010 г.).Все процедуры с участием экспериментальных животных были одобрены институциональным этическим комитетом IIT и Министерством здравоохранения и ухода за животными Италии (номер разрешения 110/2014-PR, 19 декабря 2014 г.).

Экспериментальная установка

Установка состоит из рукава для индентирования, электрофизиологической платформы на основе чипа и держателя образца (см. Рисунок 1). Плечо с углублением включает микроманипулятор XYZ (PatchStar, Scientifica, Великобритания), Z-пьезоэлектрический привод (PI p-603.5S2, Physik Instrumente) и зонд с наконечником, соединенный с интерферометром (OP1550, Optics11, Нидерланды). В основе индентора лежит консольная пружина, подвергнутая микротехнической обработке, работающая как датчик силы. Подробное описание изготовления зонда и установки индентирования можно найти в других источниках (Gruca et al., 2010; Van Hoorn et al., 2016). Специально написанное программное обеспечение LabVIEW (National Instruments) используется для обработки сигналов и управления устройствами с помощью карты сбора данных (PCIe-6361, National Instruments).Образцы сетчатки погружаются в перфузионную камеру и фиксируются на HD-MEA. Система размещается на виброизоляционном столе для минимизации внешнего шума. Все эксперименты проводятся при комнатной температуре с использованием режима контроля глубины индентирования (Antonovaite et al., 2018).

Рис. 1. Схематическое изображение установки. Зонд с наконечником с наконечником оснащен оптическим волокном для интерферометрического считывания показаний кантилевера и сферическим наконечником для вдавливания образца.Зонд установлен на Z-пьезоэлектрическом приводе, который жестко прикреплен к XYZ-манипулятору. Образцы сетчатки погружаются в перфузионную камеру и фиксируются на HD-MEA на основе высокоомного КМОП-чипа.

Протокол вдавливания для механической характеризации

Чтобы исследовать вязкоупругость образцов сетчатки, были проведены измерения развертки частоты с контролируемой глубиной при небольшой амплитуде колебаний и различных частотах. Обычно динамические вдавливания (карты) состояли из нагружающей части размером до 15 или 20 мкм со скоростью вдавливания 2 мкм / с, за которой следовали период релаксации напряжения 10 с и серия небольших синусоидальных колебаний 0.3 мкм на трех разных частотах: 0,1, 1 и 10 Гц. Для карт отпечатков мы выбрали кантилеверы с жесткостью пружины ∼0,45 Н / м, откалиброванной в соответствии с Beekmans and Iannuzzi (2015), и радиусом валика 57 и 73 мкм, измеренным с помощью оптического микроскопа.

Вдавливание было выполнено в произвольной области сетчатки по параллельным линиям с расстоянием между двумя соседними точками 50 мкм, что обеспечило отсутствие перекрытия деформированных областей. Модули кажущегося накопления и потерь были рассчитаны как:

K ′ = E′1-v2 = F0h0⁢c⁢o⁢s⁢ (Φ) ⁢π2⁢1A (1)

K ″ = E⁢ "1-v2 = F0h0⁢ (Φ) ⁢π2⁢1A (2)

, где E E ″ - накопитель и модуль потерь соответственно, F 0 - амплитуда колебательной нагрузки, h 0 - амплитуда колебательно-вдавливания, ν - коэффициент сжимаемости Пуассона (принимается равным 0.5, что соответствует несжимаемому материалу), Φ - фазовая задержка между зарегистрированным вдавливанием и колебаниями нагрузки, а A = π a 2 - площадь контакта между сферой и образцом. Радиус контакта оценивается как a = R⁢h, где R - радиус сферы, а h - глубина вдавливания. Для окончательного анализа данных использовались три карты двух сетчаток. Нормальность распределения данных проверялась с помощью теста Шапиро – Уилка.Поскольку большая часть набора данных не имела нормального распределения, для сравнения выборок данных использовался непараметрический тест Краскела – Уоллиса ANOVA. Все статистические анализы были выполнены с помощью Statistics and Machine Learning Toolbox (версия 2018a, The Mathworks, Натик, Массачусетс, США).

Электрофизиология сетчатки

Двенадцатичасовых адаптированных к темноте мышей-самцов (6-недельный возраст C57BL / 6) практически не вводили под наркоз с помощью CO2, а затем они умерщвляли шейным смещением. Как описано в Hilgen et al.(2017a), Maccione et al. (2014), после энуклеации глазных яблок сетчатка была извлечена путем аккуратного удаления всех окружающих тканей, таких как роговица, кристаллы, склера и стекловидное тело. После изоляции сетчатка была обращена вниз на предварительно кондиционированные HD-MEA (ее резервуар был заполнен нейробазалом в течение 2 часов при 37 °), при этом ганглиозный слой сетчатки соприкасался с поверхностью электродов, а слой фоторецепторов подвергался воздействию датчик вдавливания. Линия перфузии, снабжаемая перистальтическим насосом (~ 1 мл / мин), обеспечивала постоянный поток среды, состоящей из среды AMES (Sigma - Merck KGaA, Дармштадт, Германия) с 1.9 г / л бикарбоната натрия, уравновешенного карбоксигеном (95% O2 и 5% CO2). Записи внеклеточной активности RGC были получены с помощью платформы BioCam4096 с 4096 чипами Arena (3Brain AG, Wädenswil, Швейцария), которые состоят из сетки квадратных микроэлектродов 64 × 64 (21 мкм × 21 мкм, шаг 42 мкм), покрывающих площадь 2,67 мм × 2,67 мм (HD-MEA). Необработанные внеклеточные следы, отобранные с частотой 7,1 кГц / электроды, были оцифрованы с разрешением 12 бит и сохранены для автономного анализа после применения фильтра нижних частот (3.5 кГц) с помощью программного обеспечения Brainwave. Спайки во внеклеточных следах были обнаружены и отсортированы с использованием избыточной информации о пространственно смежных электродах (Hilgen et al., 2017b). Для последующего анализа рассматривались только отдельные единицы, показывающие не менее 0,1 пика / сек. После применения этой процедуры фильтрации результирующий набор данных состоит из нескольких сотен отдельных единиц на одну сетчатку.

Экспериментальный протокол для электрофизиологических характеристик

Для корреляции эффектов, вызванных механической стимуляцией слоя фоторецепторов, с пиковой активностью RGC, полученной с помощью HD-MEA, необходимы две части информации: временное окно механической стимуляции и оценка положения вдавливания по отношению к электродная сетка.Для определения временного окна стимуляции мы использовали устройство Raspberry Pi (Raspberry Pi Foundation), которое с помощью пользовательских алгоритмов Python запоминает время срабатывания триггеров, генерируемых индентором в начале и в конце фазы стимуляции относительно начальной точка записи HD-MEA. Затем эта информация была включена в последовательность импульсов, что позволило a posteriori выровнять временной интервал вдавливания в пределах зарегистрированной активности пиков. Чтобы провести датчик отпечатка на матрице электрода и оценить положение отпечатка, мы направили на сетчатку дальний красный свет в течение ~ 5 с.Эта процедура запускает индуцированное светом насыщение сигнала на всех электродах HD-MEA, за исключением тех, которые расположены в области, затененной датчиком-отпечатком (см. Рисунок 2A). После выбора посредством визуального осмотра временного интервала, в течение которого разница между ненасыщающими и насыщающими электродами была максимально заметной, мы вручную обнаружили контур отпечатка зонда. Затем мы оценили положение отпечатка как электрод, соответствующий центру сферы вдавливания, расположенной на зонде вдавливания.

Рис. 2. (A) Выравнивание датчика для вдавливания по сетке электродов HD-MEA. Контур зонда с вдавливанием определяли, глядя на ненасыщающие каналы при стимуляции дальним красным светом. (B – D) Профиль механической стимуляции как функция времени для статического вдавливания [без частотной развертки, (B) ], небольшой амплитуды колебаний [h 0 = 1 мкм, (C) ] и мягкая амплитуда колебаний [h 0 = 3 мкм, (D) ] типов стимулов.Типичные механические профили нанесены синим цветом для глубины вдавливания 10 мкм. Затем были выполнены механические вдавливания на все более глубоких уровнях в диапазоне от 10 до 60 мкм от точки контакта.

Чтобы получить прямое считывание электрических сигналов при механической деформации, мы использовали большие сферы (шарики ∼250 мкм) и исследовали определенные локальные области сетчатки с разной амплитудой и глубиной вдавливания. Каждый образец был исследован с помощью трех протоколов контролируемого вдавливания, описанных на рисунке 2, которые различались динамикой вдавливания во времени.В частности, как только зонд достиг желаемой глубины, мы проверили механический и электрофизиологический отклик сетчатки на постоянное и непрерывное смещение (рис. 2B), а также на малое (рис. 2C, h 0 = 1 мкм) или слабое (рис. 2D, h 0 = 3 мкм) амплитуда колебаний при 0,1 Гц. Как показано на рисунках 2B – D, эти протоколы выполнялись на глубине от 10 до 60 мкм для каждого экспериментального сеанса и чередовались с минимальной 2-минутной базовой записью, чтобы избежать приложения длительных нагрузок на ткань сетчатки.Перед протоколами вдавливания спонтанная активность RGC регистрировалась в течение 5 минут, чтобы получить базовый эталон активности сетчатки, и после этого реакция RGC была визуально стимулирована последовательностью черных и белых вспышек (см. раздел классификации), чтобы проверить их предпочтительный ответ. Затем зонд для вдавливания приближается к ткани, и его положение оценивается.

Анализ данных

Перед каждой фазой вдавливания мы регистрировали 120-секундную базальную импульсную активность, которую мы использовали для определения эталонного режима возбуждения RGC перед механической стимуляцией.Как для базовой фазы, так и для фазы вдавливания, средняя частота срабатывания каждого отдельного RGC была вычислена путем количественной оценки количества всплесков, возникающих в 2-секундном временном интервале, скользящем в течение периода записи с шагом 10 мс. Затем средняя скорость стрельбы была нормализована с помощью z-шкалы, чтобы обеспечить сравнение со стандартизованной скоростью стрельбы. Затем была рассчитана корреляционная матрица между нормализованной скоростью обжига как для базовой фазы, так и для фазы вдавливания.

Кластеризация аналогичной пиковой активности

Чтобы выделить модулирующие эффекты, оказываемые механическим вдавливанием на пиковую активность RGC, мы сгруппировали скорость срабатывания одиночных RGC в соответствии с их изменениями во времени.Стандартная процедура кластеризации дендрограммы была применена к нормализованной скорости срабатывания (вычисляется каждые 10 мс в течение 2-секундного скользящего окна) фазы отступа с использованием абсолютного значения корреляции Пирсона в качестве показателя сходства (Иерархическая кластеризация [(scipy.cluster.hierarchy) - Справочное руководство SciPy v1.1.0] Затем мы выбрали оптимальное количество кластеров в диапазоне от 4 до 60 путем максимизации оценки силуэта (sklearn.metrics.sil Silhouette_score - документация scikit-learn 0.20.0).Затем мы переупорядочили корреляционную матрицу базальной фазы в соответствии с кластеризацией, полученной во время фазы вдавливания, чтобы доказать, что сгруппированные RGC не были коррелированы в течение базального временного окна и, таким образом, корреляции в пиковой активности RGC возникают из-за механической стимуляции.

Классификация типов ячеек RGC ON-OFF

Чтобы оценить, являются ли субпопуляции RGC наиболее чувствительными к эффектам механической стимуляции, нам сначала пришлось идентифицировать функциональные типы клеток RGC на основе их предпочтительных ответов на зрительные стимулы.Для этого в начале эксперимента мы представили сетчатке глаза последовательность чередующихся белых / черных вспышек полного поля (0,0–0,2 кд / м 2), которые позволяют охарактеризовать характеристики отклика на пики RGC. Чтобы различать ВКЛ, ВЫКЛ и ВКЛ-ВЫКЛ RGC, мы вычислили индекс смещения (BI) как (A w −A b ) / (A w + A b ), где A w и A b - амплитуды пикового отклика по отношению к базовому уровню активности на белые и черные вспышки соответственно (Carcieri, 2003).Контроллеры RGC были помечены как ВКЛ, если BI> 0,3, ВЫКЛ, если BI <-0,3, и ВКЛ-ВЫКЛ в противном случае. Клетки, пиковая частота активации которых была на одно стандартное отклонение ниже средней базовой скорости активации, были отнесены к неклассифицированному кластеру (NC).

Классификатор дерева решений

Чтобы выделить важные физические и электрофизиологические предикторы, которые могут определять модуляцию спонтанной пиковой активности при механической стимуляции, мы применили классификатор дерева решений (scikit-learn: машинное обучение на Python - scikit-learn 0.20.2) на всех испытаниях. Эта модель машинного обучения учит, как классифицировать двоичные результаты как успешные и неудачные отступы, путем построения дерева отношений «если-то-еще» между предоставленными предикторами. В нашем сценарии предикторами являются: площадь контакта датчика вдавливания, деформация, давление, глубина вдавливания, локальная плотность RGC ниже точки вдавливания (d5, количество ячеек на расстоянии пяти электродов) и локальная скорость срабатывания RGC находится ниже точки вдавливания в базовом состоянии (r5, среднее значение по ячейкам на расстоянии пяти электродов).После обучения классификатора дерева решений важность каждой характеристики вычисляется как нормализованная важность индекса Джини. Чтобы обеспечить объективность результатов, мы получили усредненные значения, повторяя процедуру 1000 раз с разными начальными условиями.

Результаты

Основная цель этого исследования заключалась в разработке новой экспериментальной установки, способной комбинировать HD-MEA с углублением на вершине наконечника, чтобы получить представление об электромеханической связи в ткани сетчатки.

Характеристика механических свойств ткани сетчатки

Чтобы подтвердить, что динамическое вдавливание с контролируемой глубиной в верхней части наконечника способно уловить вязкоупругую природу сетчатки даже в сочетании с HD-MEA, мы выполнили три карты вдавливания на двух разных образцах.На рисунке 3 мы представляем динамический отклик сетчатки в виде очевидных модулей накопления и потерь в диапазоне частот 0,1–10 Гц. Данные развертки частоты показывают усиление жесткости ткани с увеличением частоты вдавливания как для кажущихся потерь, так и для модулей накопления. Например, усредненный модуль упругости, полученный по всем выступам, увеличивается с 0,7 кПа при 0,1 Гц до 1,7 кПа при 10 Гц.

Рис. 3. Модули (A) кажущейся памяти ( K ′) и (B) модулей потерь ( K ″) в зависимости от частоты вдавливания.Каждый столбец содержит данные двух сетчаток и около 30 измерений на частоту. ∗∗ P <0,01 и ∗∗∗ P <0,0005 по критерию Краскела – Уоллиса.

С помощью динамического вдавливания можно определить соотношение между потерями и модулем накопления, известное как тангенс угла потерь, T a n (Φ), которое обеспечивает соотношение между вязкими и упругими компонентами.

T⁢a⁢n⁢ (Φ) = E ″ E ′ (3)

Из тангенса угла потерь на рисунке 4 можно заметить, что при стимуляции ткани с частотой 10 Гц вклад вязкости выше по сравнению с низкими частотами, и, следовательно, ткань имеет более высокую демпфирующую способность.

Рисунок 4. Тангенс потерь: тангенс угла сдвига фаз между нагрузкой и вдавливанием как функция частот.

Механическое вдавливание влияет на спонтанную активность ганглиозных клеток сетчатки

После характеристики механических свойств ткани сетчатки мы исследовали электрофизиологический ответ, сигнализируемый пиковой активностью RGC, на механическую стимуляцию. Общая цель этого раздела - проверить возможности комбинирования индентирования с точностью до микрометра с HD-MEA для исследования эффектов механической стимуляции в нервной ткани.Как подчеркивалось выше, мы одновременно регистрировали пиковую активность сотен RGC с помощью системы HD-MEA, в то же время локально вдавливая слой фоторецепторов (см. Рисунок 5), чтобы изучить пространственно-временное распределение скорости срабатывания RGC. Затем, после идентификации отвечающих RGC, мы проверили, была ли передача механических сигналов прерогативой определенного подтипа RGC, а именно клеток ON, OFF или ON-OFF.

Рисунок 5. Гетерогенный ответ пиковой активности ганглиозных клеток сетчатки (RGC) на механическую стимуляцию.Большой квадрат представляет пиковую активность сетчатки, полученную с помощью HD-MEA. Цветовой код каждого пикселя - это средняя частота срабатывания RGC, записанная с определенного электрода. Красная закругленная заштрихованная область выделяет область отступа. Каждая вставка (из A - G ) сообщает о динамике временных пиков различных RGC в ответ на одну и ту же механическую стимуляцию (красная вертикальная линия представляет время стимуляции).

HD-MEAs Записи

HD-MEAs могут измерять биоэлектрическую активность сотен RGC на большой части ткани.При применении локализованного механического удара сферическим концом зонда с вдавливанием мы сосредоточили наше внимание на возможных модуляциях скорости стрельбы, вызванных на панретинальной шкале. Несмотря на то, что RGC хранятся в темноте, они всегда активны, и их пиковая активность не проявляет особых пространственно-временных структур. Однако в зависимости от паттернов возбуждения, возникающих в ответ на чередующуюся последовательность черных и белых вспышек, которые визуально стимулируют слой фоторецепторов, можно различить ВКЛ, ВЫКЛ и ВКЛ-ВЫКЛ RGC.RGC, не отнесенные ни к одному из упомянутых типов, были сгруппированы в четвертый класс (NC).

Мы провели эксперименты на семи сетчатках, вдавив фоторецепторный слой на четыре глубины (10-20-30-60 мкм), и в трех сетчатках мы смогли обнаружить механически индуцированные ответы в пиковой активности более 100 RGC на более чем 300 рассмотренных RGC. для каждой сетчатки см. Таблицу 1.

Таблица 1. Сводка механических протоколов, которые определяли изменение скорости возбуждения ганглиозных клеток сетчатки.

Механическая стимуляция вызывает в подмножестве RGC множество различных реакций, как показано на Рисунке 5. Неоднородные ответы включают, но не ограничиваются этим, увеличение скорости возбуждения в начале (Рисунок 5A), на смещении (Рисунок 5B) или оба (рис. 5C) временного интервала стимуляции. Более того, мы наблюдали снижение скорости стрельбы в начале (рис. 5D) или смещении (рис. 5E). Наконец, в то время как мы зарегистрировали несколько RGC с восстановительной активностью (Рисунок 5F), большая часть RGC была нечувствительна к механической стимуляции (Рисунок 5G).

Механическая стимуляция для определения коррелированной пиковой активности

Чтобы выяснить и описать эффекты локализованной механической стимуляции в масштабе пан-сетчатки, мы сгруппировали вместе RGC, чья пиковая активность коррелировалась или антикоррелировалась во время временного окна вдавливания (рис. 6А). Интересно, что этот подход обнаруживает наличие коррелированных кластеров RGC во время временного окна отступа, которые демонстрируют следующие особенности. Во-первых, их расположение не сохраняется на базальной записи, т.е.е., временной интервал, предшествующий началу стимуляции, где внутрикластерная корреляция резко падает (Рисунок 6B). Во-вторых, группы коррелированных RGC хорошо разделены в пространстве и расположены вокруг пятна вдавливания на расстоянии до миллиметра (рис. 6С). В-третьих, как показано на растровом графике на фиг. 6D, механически вызванные ответы напоминают ответы, полученные при визуальной стимуляции, несмотря на значительно более длительный временной масштаб активации (десятые доли секунд вместо десятых миллисекунд, соответственно).В-четвертых, пиковая активность RGC в обнаруженных кластерах в основном характеризуется длительным увеличением их скорости срабатывания на несколько секунд (см. Рисунок 6E). Тем не менее, ингибирование наблюдалось в очень немногих RGC, о чем мы поговорим более подробно в следующем абзаце. Подобно классификации ON-OFF, полученной в ответ на зрительные стимулы, мы могли различать RGC, которые активировались только при возникновении давления (красноватые кластеры), при сбросе давления (зеленоватые кластеры) или обоих (голубоватые кластеры).В-пятых, эти задержки отклика согласуются с относительным положением RGC от пятна вдавливания (на рисунке 6C цветные точки представляют и выделяют RGC, которые показали ответ, модулированный механическим вдавливанием, наоборот, белые точки). Эти особенности наблюдались в трех сетчатках, которые эффективно ответили на механическую стимуляцию (см. Дополнительный рисунок S1), тогда как пиковая активность остальных сетчаток во время интервала времени механической стимуляции оставалась неотличимой от их базальной.Несмотря на эти безуспешные испытания (подробное обсуждение см. Ниже), наши результаты по-прежнему показывают, что сетчатка может передавать информацию о физическом мире в цепочках спайков RGC и что механическая стимуляция может нарушать спайковую активность в расширенных областях сетчатки.

Рис. 6. Влияние локальной механической стимуляции на спонтанную активность ганглиозных клеток сетчатки (RGC). (A) Переупорядоченная матрица корреляции, выявляющая кластеры коррелированных RGC в течение интервала времени отступа (блоки с цветовой кодировкой). (B) Корреляционная матрица базальной активности, переупорядоченная в соответствии с кластеризацией в (A) , показывает другое расположение корреляций. (C) Положение RGC, модулированных (цветная точка) или нет (белая точка) механической стимуляцией. (D) Растровый график пиковой активности RGC в каждом кластере (разделенных цветными линиями) в течение интервала времени отступа (красная вертикальная линия, начало). (E) Скорость стрельбы RGC с оценкой Z во время вдавливания (сплошная линия, среднее значение; заштрихованная область, s.Эм.). Цветовые коды для членства в кластере во всех панелях.

Обработка механических и визуальных сенсорных входов

Хотя временные шкалы механически вызванных ответов несопоставимы с визуальными, мы проверили, одинаково ли модулировалась функциональная субпопуляция RGC, а именно ON- / OFF- или ON-OFF-типа. Мы функционально классифицировали RGC в соответствующие кластеры, обнаруженные путем количественной оценки индекса смещения пиковой реакции на белые и черные полнопольные визуальные стимулы (см. Раздел «Материалы и методы»).Интересно, что в наших экспериментальных условиях скотопической яркости ответ OFF-RGCs доминирует над ответом ON-RGC по амплитуде, в то время как неклассифицированные единицы (NC) были едва чувствительны к зрительным стимулам с незначительным, незначительным предпочтением белых вспышек ( NC-типа). Чтобы оценить, будет ли субпопуляция в первую очередь участвовать в передаче механической информации, мы вычислили средний состав RGC типа ON, OFF, ON-OFF и NC в связанных кластерах («реагирующие на стимулы») или нет («не реагирующие на стимулы ») на любой механически вызванный ответ (рис. 7А).В то время как распределение типов клеток в кластерах «невосприимчивых к стимулам» было довольно схожим по сетчатке, кластеры «реагирующие на стимулы» состоят по крайней мере на 15% больше ON-RGC, чем аналоги «не реагирующие на стимулы». Таким образом, различное распределение типов клеток указывает на фундаментальный вклад информационного пути ON по сравнению с другими, рассматриваемыми в нашем анализе. Учитывая, что наша метрика кластеризации чувствительна как к коррелированным, так и к антикоррелированным действиям, мы исследовали, можем ли мы путем дальнейшего разделения кластеров «реагирующих на стимулы» в соответствии с классификацией ВКЛ-ВЫКЛ RGC выявить дополнительные характеристики реакции на механические стимулы.Это было выполнено путем сравнения скорости стрельбы во время механической (рис. 7В) стимуляции.

Рис. 7. Классификация механически вызванных всплесков ВКЛ-ВЫКЛ. (A) Распределение ВКЛ, ВКЛ-ВЫКЛ, ВЫКЛ и NC RGC в кластерах, связанных («отвечающих на стимулы») или нет («не реагирующих на стимулы») с механически вызванными ответами. (B) Четыре верхних кластера на рисунке 6E были дополнительно разложены в соответствии с типом ячеек. Вертикальная линия красного цвета отмечает время начала отступа.

Чтобы исследовать наиболее важные параметры, которые могут вызвать модуляцию спонтанной активности RGC при механической стимуляции, мы организовали наши данные с помощью подхода машинного обучения. На Фигуре 8A показана матрица попарного рассеяния электрофизиологических и физических параметров (предикторов), участвующих в экспериментах по вдавливанию, которая показывает для каждого условия, вызвало ли механическое раздражение модуляцию активности возбуждения RGC, сравнимую с иллюстративным примером на Фигуре 6A ( успешно, красная точка), или механическая стимуляция не повлияла на исходное возбуждение сетчатки (неудачное, синие точки).Основываясь на этих наблюдениях, мы обучили дерево решений изучению набора правил if-then-else, упорядоченных в виде дерева, которые разбивают пространство параметров на успешные и неудачные области, учитывая значения предикторов. После обучения мы можем интерпретировать правила, которым научилась модель для определения успешных и неудачных испытаний, глядя на структуру дерева. Действительно, вычисляя, как часто предиктор используется в дереве для разделения данных и насколько предиктор уменьшает примесь (т.д., доля успешных и неудачных испытаний до и после разделения), мы можем оценить, насколько важна такая функция. Как показано на рисунке 8B, согласно модели дерева решений, локальная плотность RGC (d5), приложенное давление (давление) и локальная интенсивность стрельбы (r5) являются теми, которые наиболее эффективно предоставляют информацию о том, является ли данный вдавливание может вызвать модуляцию скорости спонтанной активации RGC.

Рис. 8. Детерминанты, лежащие в основе физиологической реакции на вдавливание. (A) Вне диагонали: попарные диаграммы разброса физических (площадь контакта, деформация, давление, глубина) и электрофизиологических (d5: средняя плотность RGC в пределах пяти электродов, r5: средняя частота воспламенения RGC в пределах пяти электродов) предикторов электрофизиологический ответ на механическое раздражение. На каждом графике разброса показано, вызвало ли механическое вдавливание модуляцию скорости срабатывания RGC (успешное испытание, красные точки) или нет (неудачное испытание, синие точки) в зависимости от пары предикторов.Диагональ: гистограмма распределения каждого предиктора. (B) Относительная важность физических и электрофизиологических характеристик в модели дерева решений, обученной предсказывать успешные и неудачные испытания на основе данных в (A) . Обученная модель предполагает, что локальная плотность (d5), давление и локальная интенсивность стрельбы (r5) являются наиболее эффективными предикторами, используемыми моделью дерева решений, чтобы отделить успешные испытания от неудачных.

Обсуждение

В данной работе мы разработали экспериментальную платформу, объединяющую датчик силы с контролируемой глубиной и планарный прибор HD-MEAs.Эта платформа позволяет исследовать влияние контактной силы на активность мозговых цепей, определяемую крупномасштабными записями активности нейронов. Чтобы продемонстрировать эту технологию, мы исследовали влияние механических стимулов на электрофизиологический ответ на зрительные стимулы сетчатки эксплантированных мышей. Мы одновременно записали активность многих RGC и исследовали влияние на световые реакции трех подтипов RGC, а именно ВКЛ, ВЫКЛ и ВКЛ-ВЫКЛ.

Выполнив первые тесты вдавливания в частотной области с контролируемой глубиной на сетчатке мышей, о которых когда-либо сообщалось в литературе, мы могли наблюдать, что в 0.В диапазоне 1–10 Гц как кажущиеся модули накопления, так и модули потерь увеличиваются с частотой вдавливания - вязкоупругое поведение, которое ранее наблюдалось как релаксация напряжения и в экспериментах по объемной реологии (Lu et al., 2006; Zhang et al., 2018). К сожалению, прямое сравнение с другими измерениями вязкоупругости невозможно, потому что последние были выполнены либо на образцах другого типа (сетчатка человека или свиньи), либо в наномасштабе (отдельные клетки или монослои клеток), что дает очень разные результаты.С количественной точки зрения интересно отметить, что с точки зрения кажущегося модуля упругости на низких частотах наши результаты хорошо согласуются с Franze et al. (2011), даже если измерения выполняются по разным протоколам индентирования. Более того, на рисунке 3 показано, что как K ', так и K ″ увеличиваются с увеличением частоты деформации в соответствии с многочисленными предыдущими исследованиями биологических тканей (Mahaffy et al., 2004; Hrapko et al., 2005; Temple et al. al., 2016; Burton et al., 2017). Тренд K 'и K' по частотам зависит от спектра времени релаксации (Deshpande, 2018). В исследуемом здесь диапазоне частот кажущийся модуль упругости K 'всегда превышает модуль потерь K', указывая на преобладающую упругую реакцию материала. Более того, поскольку K 'продолжает увеличиваться с частотой, ожидается, что частота релаксации материала будет вне и правее исследуемого диапазона 0,1–10 Гц.

Однако высокое значение Tan (Φ) предполагает, что критически важно механически охарактеризовать сетчатку, учитывая как эластичность, так и вязкость.Даже если вязкостью нельзя пренебречь, подтверждается преобладание упругого поведения сетчатки над ее вязким. Из значений, представленных на рисунке 4, можно наблюдать небольшие изменения локальной вязкоупругости; Однако наши результаты, полученные при сканировании поверхности образца с пространственным разрешением 50 мкм, недостаточны для оценки локальной неоднородности тканей. Следовательно, в будущем, чтобы точно исследовать взаимосвязь между внутренней морфологической структурой сетчатки и ее механической неоднородностью, необходимо выполнять карты вязкоупругости с высоким разрешением.

С помощью комбинации системы HD-MEAs с микро-вдавливанием мы изучили модуляцию активности RGCs-пиковой активности эксплантированных сетчаток мышей в ответ на механические микростимуляции их фоторецепторного слоя. Наши предварительные результаты показывают, что можно определить корреляцию между механической стимуляцией сетчатки и ее электрическими сигналами. В частности, мы наблюдаем повышенную частоту срабатывания в течение интервала времени вдавливания, в основном связанного с ON-RGC.В согласии с Rountree et al. (2018), мы обнаружили, что механическая стимуляция эксплантированных сетчаток вызывает пространственно локализованные реакции сетчатки, аналогичные вызванным светом, при определенных механических условиях - глубина вдавливания> 20 мкм и деформация вдавливания ε> 0,05 (Lin et al., 2009). Однако Rountree et al. (2018) сообщили, что среднее давление, способное механически стимулировать сетчатку, составляет 0,69 кПа, в то время как в наших экспериментах с контролируемой глубиной мы обнаружили, что минимальное давление для механической стимуляции сетчатки составляет всего 0.02 кПа, что, возможно, означает, что глубина вдавливания и радиус сферы являются наиболее важными параметрами, которые могут вызвать световую реакцию. Наши экспериментальные данные показывают, что цепь сетчатки может передавать информацию о механических стимулах, модулируя активность RGC и, таким образом, вывод закодированных визуальных стимулов той же цепью сетчатки. Записи механически индуцированного ответа RGC показывают более длительную задержку от стимулов (десятки секунд) по сравнению с задержкой вызванных светом зрительных ответов (миллисекунды).Эта задержка ответа может быть связана с медленными профилями вдавливания, используемыми в наших измерениях, или с тем фактом, что механический удар сосредоточен на слое фоторецептора, и напряжение распространяется в определенном временном масштабе до слоев ганглиозных клеток. В этом контексте в будущем было бы интересно настроить профиль вдавливания (например, скорость вдавливания, амплитуду и частоту колебаний), чтобы модулировать и точно изучить распространение механически вызванной реакции в ткани.

Учитывая, что наши результаты показывают, что механические стимулы, вероятно, кодируются в активности RGC, вместо этого другая интригующая возможность заключается в том, что RGC передают в нижележащие области множественную сенсорную информацию (Križaj, 2016) и, в частности, внутриглазное давление (Kalapesi et al., 2005 ). В этом сценарии разные сообщения могут передаваться одним и тем же путем с использованием разных шкал времени в качестве носителей информации.

Интересно, что мы также наблюдали, что механически вызванные ответы пространственно распределены в окружении места вдавливания, а не только под стимулируемой точкой, что, возможно, указывает на медленное горизонтальное распространение механически вызванного биоэлектрического возмущения по ткани сетчатки.Этот результат может быть согласован с распространением кальциевых волн в клетках Мюллера, вызванных сигналами давления (Newman and Zahs, 1997). Такие кальциевые волны действительно могут влиять на пиковую активность ганглиозных клеток сетчатки, модулируя их реакцию на зрительную стимуляцию (Newman and Zahs, 1998). Кроме того, модуляция базальной скорости возбуждения, которую мы наблюдали в этой работе, согласуется с временной шкалой кальциевых волн клеток Мюллера (Newman and Zahs, 1997; Lindqvist et al., 2010).

Однако биологическое происхождение модуляции скорости возбуждения, наблюдаемой в этой работе, не ограничивается активацией клеток Мюллера, но может быть связано с другими механизмами, действующими вместе, такими как прямая модуляция фоторецепторов и горизонтальных клеток (Tan et al., 2006).

В конечном счете, наши результаты могут бросить тень на эффекты использования утяжелителей (например, металлических якорей), обычно используемых в электрофизиологических экспериментах на эксплантированных сетчатках. Действительно, в свете того, что продемонстрировано в этой работе, мы не можем исключить наличие искажения в сигнале сетчатки, вызванного постоянным давлением, создаваемым внешним весом, обычно используемым во время сеансов записи для удержания ткани прикрепленной к поверхности многоэлектродного массива. О некоторых возможных побочных эффектах уже сообщалось в литературе (Fujii et al., 2016) и требуют дальнейшего изучения, чтобы определить, связаны ли эти различия с проблемой сцепления электродов с тканью (т. Е. Собранные сигналы меняются в зависимости от веса якоря, потому что расстояние между электродами и RGC различается) или постоянная сила, приложенная к сетчатке, мешает зрительной обработке, что приводит к изменению выходного сигнала RGC.

Более того, стоит упомянуть, что неуспешные индуцированные ответы могут объясняться несколькими факторами.Прежде всего, нашей целью было выяснить, может ли сетчатка реагировать на легкие механические стимулы, чтобы избежать эффектов второго порядка, в основном из-за повреждения сетчатки. Как следствие, мы решили подавать неглубокие механические стимулы и ожидали увидеть больше неудачных, чем успешных испытаний. Вторым основным источником вариабельности между испытаниями является расположение отпечатка. В частности, мы нацелены на области сетчатки, в которых сцепление с MEA было оптимальным. Однако такой эвристический критерий может привести к стимуляции участков сетчатки, которые, по сути, , , функционально и структурно различаются локально.Более того, мы не смогли точно определить, в какой области образца мы делали отпечатки (центр против периферии, медиальный против латерального, фронтальный против носового). Конечно, электрофизиологический ответ сетчатки может различаться между этими областями, и будет крайне интересно исследовать в будущем, если, например, неудачные случаи связаны с различными областями сетчатки. В-третьих, одна из основных проблем проведения этих экспериментов на живой ткани связана с необходимостью поддерживать ткань в стабильном и живом состоянии во время измерений.Весь протокол стимуляции занимает около 20 минут на каждое место. Следовательно, эти временные шкалы не позволяют нам отобразить всю сетчатку in vivo , а долгосрочная шкала может поставить под угрозу жизнеспособность ткани, индуцируя меж- и интраретинальную изменчивость. Другой фактор вариабельности между сетчатками может быть связан с приготовлением самого биологического образца и иммобилизацией образца на поверхности многоэлектродной матрицы. Адгезия сетчатки к поверхности многоэлектродной матрицы чрезвычайно важна для того, чтобы избежать стимуляции плавающей ткани, а не исследования ее жесткости.

Заключение

В заключение, мы представили новый метод, который позволяет анализировать каскад электрических сигналов, проходящих через нейронные сети при контролируемой механической стимуляции, и который позволяет надежно измерять вязкоупругие свойства мягких биологических образцов. В будущем комбинация системы HD-MEA с микровыступами может предложить уникальную возможность исследовать влияние механической стимуляции на электрофизиологическую активность нейрональной ткани также при разрешении отдельных клеток и на широкой части биологической ткани, такой как стволовые клетки (Vogel, Sheetz, 2006; Reilly, Engler, 2010; Yim, Sheetz, 2012; Vining, Mooney, 2017), сердце (Terracio et al., 1988; Франц и др., 1989; Kohl et al., 2006), легкие (Wirtz and Dobbs, 2000), мышцы (Hunt, 1952; Crago et al., 1976) и кожу (Chouvardas et al., 2008). Наконец, поскольку механический стресс может модулировать физиологические процессы на молекулярном и клеточном уровне, мы ожидаем, что этот инструмент станет важным шагом вперед в получении нового понимания взаимосвязи между измененной механочувствительной передачей сигналов, ригидностью и патологиями.

Заявление о доступности данных

Все необработанные и обработанные данные этого исследования доступны по разумному запросу у соответствующего автора.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено институциональным комитетом по этике IIT и Министерством здравоохранения и защиты животных Италии (номер разрешения 110/2014-PR, 19 декабря 2014 г.).

Авторские взносы

LB и DI разработали исследование. HH и AM провели предварительные эксперименты. MM, DL и FB провели эксперименты и проанализировали данные. SZ предоставила алгоритм python для запуска во временном окне стимуляции.Рукопись написали MM, DL, FB, DI и LB. Все авторы критически отредактировали рукопись на предмет интеллектуального содержания и одобрили окончательную рукопись.

Финансирование

MM получил финансовую поддержку Европейского исследовательского совета в рамках Седьмой рамочной программы Европейского союза (FP / 20072013) / грантового соглашения ERC No. 615170.

Конфликт интересов

DI заявляет о потенциальном конфликте интересов как основатель, акционер и советник Optics11.

Остальные авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы благодарим рецензентов за помощь в улучшении рукописи, выразившую обеспокоенность по поводу некоторых результатов, которые привели к исправлению ошибок в коде создания изображений. MM благодарит Э. Паардекама за техническую поддержку и Н. Антоновайте за плодотворные обсуждения. DL и FB выражают признательность М. Нанни и Дж. Пруццо за их техническую поддержку и грантовое соглашение № 1 для европейского проекта RENVISION (FP7-ICT-2011-9). 600847 для разработки CMOS-платформы для записи острых изображений сетчатки.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fnins.2019.01023/full#supplementary-material

Список литературы

Агте, С., Паннике, Т., Ульбрихт, Э., Райхенбах, А., и Брингманн, А. (2017). Два разных механочувствительных ответа на кальций в глиальных клетках Мюллера сетчатки морской свинки: дифференциальная зависимость от передачи сигналов пуринергических рецепторов. Glia 65, 62–74.DOI: 10.1002 / glia.23054

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Антоновайте, Н., Бикманс, С. В., Хол, Э. М., Вадман, В. Дж., И Яннуцци, Д. (2018). Региональные вариации жесткости в тканях мозга живых мышей, определенные с помощью картирования отпечатков с контролем глубины. Sci. Отчет 8: 12517. DOI: 10.1038 / s41598-018-31035-y

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бикманс, С. В., Ианнуцци, Д. (2015). Метрологический подход к калибровке датчиков силы с интерферометрическим считыванием. Surf. Топогр. Метрол. Свойство 3: 025004. DOI: 10.1088 / 2051-672X / 3/2/025004

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бономи, Л., Марчини, Г., Марраффа, М., и Морбио, Р. (2001). Взаимосвязь между внутриглазным давлением и глаукомой в определенной популяции. Данные исследования глаукомы Egna-Neumarkt. Ophthalmologica 215, 34–38. DOI: 10.1159 / 000050823

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бертон, Х.Э., Фрейдж, Дж. М., Эспино, Д. М. (2017). Динамическая вязкоупругость и поверхностные свойства левой передней нисходящей коронарной артерии свиньи. Cardiovasc. Англ. Technol. 8, 41–56. DOI: 10.1007 / s13239-016-0288-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Франц, М. Р., Бурхофф, Д., Юэ, Д. Т., и Сагава, К. (1989). Механически индуцированные изменения потенциала действия и аритмия в изолированных и in situ сердцах собак. Cardiovasc. Res. 23, 213–223. DOI: 10.1093 / cvr / 23.3.213

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Франце, К. (2018). Интеграция механических и химических сигналов в развивающемся мозге. Biophys. J. 114: 19a. DOI: 10.1016 / j.bpj.2017.11.146

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Franze, K., Francke, M., Günter, K., Christ, A. F., Körber, N., Reichenbach, A., et al. (2011). Пространственное картирование механических свойств живой сетчатки с помощью сканирующей силовой микроскопии. Soft Matter 7, 3147–3154. DOI: 10.1039 / c0sm01017k

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фуджи, М., Сунагава, Г. А., Кондо, М., Такахаши, М., и Мандай, М. (2016). Оценка микроэлектроретинограмм, записанных с помощью множества электродов, для оценки фокальной функции сетчатки. Sci. Отчет 6: 30719. DOI: 10.1038 / srep30719

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Грука, Г., Де Ман, С., Сламан, М., Ректор, Дж.Х., Ианнуцци Д. (2010). Микрообработанные устройства с наконечником наконечника: конструкция, изготовление, характеристики. Измер. Sci. Technol. 21: 094033. DOI: 10.1088 / 0957-0233 / 21/9/094033

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Grüsser, O.J., Grüsser-Cornehls, U., Kusel, R., and Przybyszewski, A. W. (1989). Ответы ганглиозных клеток сетчатки на деформацию глазного яблока: нейрофизиологическая основа «фосфенов под давлением». Vis. Res. 29, 181–194. DOI: 10.1016 / 0042-6989 (89)

-5

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хемфилл, М. А., Даут, С., Ю., К. Дж., Дабири, Б. Э., и Паркер, К. К. (2015). Черепно-мозговая травма и нейрональное микросредство: потенциальная роль нейропатологической механотрансдукции. Neuron 85, 1177–1192. DOI: 10.1016 / j.neuron.2015.02.041

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Hilgen, G., Pirmoradian, S., Pamplona, ​​D., Kornprobst, P., Cessac, B., Hennig, M. H., et al. (2017а). Панретинальная характеристика световых ответов от ганглиозных клеток в развивающейся сетчатке мыши. Sci. Отчет 7: 42330. DOI: 10.1038 / srep42330

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Hilgen, G., Sorbaro, M., Pirmoradian, S., Muthmann, J.-O., Kepiro, I.E., Ullo, S., et al. (2017b). неконтролируемая сортировка пиков для крупномасштабных многоэлектродных решеток с высокой плотностью размещения. Cell Rep. 18, 2521–2532.DOI: 10.1016 / j.celrep.2017.02.038

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Храпко, М., Ван Доммелен, Дж. А., Петерс, Г. У., и Висманс, Дж. С. (2005). «Механическое поведение мозговой ткани: реакция на большие деформации и конститутивное моделирование», в Трудах Международного исследовательского совета по биомеханике удара - 2005 Международная конференция IRCOBI по биомеханике удара (Флоренция: IRCOBI).

Google Scholar

Хант, К.С. (1952). Влияние рецепторов растяжения мышц на выброс мотонейронов. J. Physiol. 117, 359–379. DOI: 10.1113 / jphysiol.1952.sp004754

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Калапеси, Ф. Б., Тан, Дж. К., и Коронео, М. Т. (2005). Каналы с растяжкой: мини-обзор. Каналы с активированным растяжением - это окулярный барометр? Clin. Exp. Офтальмол. 33, 210–217. DOI: 10.1111 / j.1442-9071.2005.00981.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Коль, П., Болленсдорф, К., Гарни, А. (2006). Влияние механочувствительных ионных каналов на электрофизиологию желудочков: экспериментальные и теоретические модели. Exp. Physiol. 91, 307–321. DOI: 10.1113 / expphysiol.2005.031062

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лин, Д. К., Шрайбер, Д. И., Димитриадис, Э. К., и Хоркай, Ф. (2009). Сферическое вдавливание мягкой материи за пределы режима Герца: численное и экспериментальное подтверждение моделей гиперупругости. Biomech. Модель. Механобиол. 8, 345–358. DOI: 10.1007 / s10237-008-0139-9

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Линдквист, Н., Лю, К., Зайдач, Дж., Франце, К., и Райхенбах, А. (2010). Глиальные клетки сетчатки (Мюллера): чувствуют растяжение тканей и реагируют на них. Investig. Офтальмол. Vis. Sci. 51, 1683–1690. DOI: 10.1167 / iovs.09-4159

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лу, Ю.-Б., Франце, К., Зайферт, Г., Штайнхаузер, К., Кирхгоф, Ф., Вольбург, Х. и др. (2006). Вязкоупругие свойства отдельных глиальных клеток и нейронов ЦНС. Proc. Natl. Акад. Sci. США 103, 17759–17764. DOI: 10.1073 / pnas.0606150103

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Maccione, A., Hennig, M.H., Gandolfo, M., Muthmann, O., van Coppenhagen, J., Eglen, S.J., et al. (2014). После онтогенеза ретинальных волн: пан-ретинальные записи динамики популяции новорожденных мышей. J. Physiol. 592, 1545–1563. DOI: 10.1113 / jphysiol.2013.262840

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Mahaffy, R.E., Park, S., Gerde, E., Kä, J., and Shih, C.K. (2004). количественный анализ вязкоупругих свойств тонких участков фибробластов с помощью атомно-силовой микроскопии. Biophys J. 86, 1777–1793. DOI: 10.1016 / S0006-3495 (04) 74245-9

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мансака, С.М., Агсалда, М., Троэльструп, Д., Ху, Н., Ю, К., и Ширамизу, Б. (2009). Характеристики фенотипа активированных моноцитов поддерживают r5-тропный вирус иммунодефицита человека. Immunol. Иммуногенет. Insights 1, 15–20.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Раунтри, К. М., Мэн, К., Трой, Дж. Б. и Саггер, Л. (2018). Механическое раздражение сетчатки: терапевтическая возможность и клеточный механизм. IEEE Trans. Neural Syst. Rehabil. Англ. 26, 1075–1083.DOI: 10.1109 / TNSRE.2018.2822322

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рыскамп Д. А., Витковский П., Барабас П., Хуанг В., Келер К., Акимов Н. П. и др. (2011). Ваниллоид 4, полимодальный ионный канал, временный рецепторный потенциал, модулирует приток кальция, скорость всплесков и апоптоз ганглиозных клеток сетчатки мыши. J. Neurosci. 31, 7089–7101. DOI: 10.1523 / JNEUROSCI.0359-11.2011

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Саппингтон, Р.М., Сидорова, Т., Уорд, Н. Дж., Чакраварти, Р., Хо, К. В., и Калкинс, Д. Дж. (2015). Активация временного рецепторного потенциала ваниллоида-1 (TRPV1) влияет на то, как нейроны ганглиозных клеток сетчатки реагируют на стресс, связанный с давлением. Каналы 9, 102–113. DOI: 10.1080 / 19336950.2015.1009272

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Скатчков, С. Н., Итон, М. Дж., Шуба, Ю. М., Кучерявых, Ю. В., Дерст, К., Вех, Р. В. и др. (2006). Калиевые каналы тандем-порового домена функционально экспрессируются в глиальных клетках сетчатки (Мюллера). Glia 53, 266–276. DOI: 10.1002 / glia.20280

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тан, Дж. К. Х., Калапеси, Ф. Б., и Коронео, М. Т. (2006). Механочувствительность и глаза: клетки справляются с давлением. Br. J. Ophthalmol. 90, 383–388. DOI: 10.1136 / bjo.2005.079905

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Темпл, Д. К., Седерлунд, А. А., Лоулесс, Б. М., Аспден, Р. М., и Эспино, Д.М. (2016). Вязкоупругие свойства суставного хряща человека и крупного рогатого скота: сравнение частотно-зависимых тенденций. BMC Musculoskelet. Disord. 17: 419. DOI: 10.1186 / s12891-016-1279-1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Террасио, Л., Миллер, Б. и Борг, Т. К. (1988). Эффекты циклической механической стимуляции клеточных компонентов сердца: in vitro. Vitr. Cell. Dev. Биол. 24, 53–58. DOI: 10.1007 / BF02623815

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван Хорн, Х., Курниаван, Н. А., Кендеринк, Г. Х., и Яннуцци, Д. (2016). Локальный динамический механический анализ неоднородной мягкой материи с использованием вдавливания наконечника наконечника. Soft Matter 12, 3066–3073. DOI: 10.1039 / c6sm00300a

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Вининг, К. Х., Муни, Д. Дж. (2017). Механические силы управляют поведением стволовых клеток в процессе развития и регенерации. Нат. Преподобный Мол. Cell Biol. 18, 728–742. DOI: 10.1038 / nrm.2017.108

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Wygnanski-Jaffe, T., Murphy, C.J., Smith, C., Kubai, M., Christopherson, P., Ethier, C.R., et al. (2007). Защитные механизмы глаза у дятлов. Eye 21, 83–89. DOI: 10.1038 / sj.eye.6702163

апартеид | Определение, факты, начало и конец

Политика апартеида (африкаанс: «обособленность»), которая регулировала отношения между белым меньшинством и небелым большинством в Южной Африке и санкционировала расовую сегрегацию и политическую и экономическую дискриминацию в отношении небелых.Внедрение апартеида, часто называемого «раздельным развитием» с 1960-х годов, стало возможным благодаря Закону о регистрации населения 1950 года, который классифицировал всех южноафриканцев как банту (все чернокожие африканцы), цветных (представители смешанной расы) или белых. . Позднее была добавлена ​​четвертая категория - азиатская (индийская и пакистанская).

пляж в эпоху апартеида, Южная Африка

Знак на пляже в Дурбане, Южная Африка, в 1989 году, в эпоху апартеида. Он ограничивает использование пляжа «членами группы белой расы» в соответствии с законами Южной Африки о расовой сегрегации того времени.Законодательный апартеид закончился в начале 1990-х годов.

Guinnog (cc-by-sa-3.0)

Популярные вопросы

Что такое апартеид?

Апартеид (африкаанс: «обособленность») - это название политики, которая регулировала отношения между белым меньшинством и небелым большинством в Южной Африке в 20 веке. Хотя расовая сегрегация там практиковалась уже давно, название апартеид впервые было использовано примерно в 1948 году для описания политики расовой сегрегации, проводимой правительством белого меньшинства.Апартеид диктовал, где южноафриканцы, в зависимости от их расы, могли жить и работать, какое образование они могли получить и могли ли они голосовать. События начала 1990-х годов ознаменовали конец законодательно закрепленного апартеида, но социально-экономические последствия остались глубоко укоренившимися.

Когда начался апартеид?

Расовая сегрегация давно существовала в Южной Африке, управляемой белым меньшинством, но эта практика была расширена при правительстве, возглавляемом Национальной партией (1948–94), и партия назвала свою политику расовой сегрегации апартеидом (африкаанс: «обособленность»). »).Закон о регистрации населения 1950 года классифицировал южноафриканцев как банту (чернокожие африканцы), цветные (представители смешанной расы) или белые; Позднее была добавлена ​​азиатская (индийская и пакистанская) категория. Другие акты апартеида диктовали, где южноафриканцы, исходя из их расовой принадлежности, могли жить и работать, тип образования, который они могли получить, могли ли они голосовать, с кем они могли общаться и какие отдельные общественные объекты они могли использовать.

Как закончился апартеид?

Под управлением президента ЮАР Ф.В. де Клерка, закон, поддерживающий апартеид, был отменен в начале 1990-х годов, а новая конституция - конституция, предоставившая избирательные права чернокожим и другим расовым группам - была принята в 1993 году. Всенародные национальные выборы, проведенные в 1994 году, привели к формированию правительства черного большинства во главе с видный активист против апартеида Нельсон Мандела из партии Африканский национальный конгресс. Хотя эти события ознаменовали конец законодательно закрепленного апартеида, социальные и экономические последствия апартеида по-прежнему глубоко укоренились в южноафриканском обществе.

Что такое эпоха апартеида в истории Южной Африки?

Эпоха апартеида в истории Южной Африки относится к тому времени, когда Национальная партия возглавляла правительство белого меньшинства страны, с 1948 по 1994 год. Апартеид (африкаанс: «обособленность») - это название, которое партия дала своей расовой сегрегации. политики, основанной на истории расовой сегрегации страны между правящим белым меньшинством и небелым большинством. В это время политика апартеида определяла, где южноафриканцы, исходя из их расы, могут жить и работать, тип образования, который они могут получить, могут ли они голосовать, с кем они могут общаться и какие отдельные общественные объекты они могут использовать. .

Расовая сегрегация, разрешенная законом, широко практиковалась в Южной Африке до 1948 года, но Национальная партия, занявшая свой пост в этом году, расширила политику и дала ей название апартеид . В соответствии с Законом о групповых территориях 1950 года в городских районах были созданы жилые и коммерческие секции для каждой расы, а представителям других рас было запрещено жить, вести бизнес или владеть землей в них. На практике этот и два других закона (1954, 1955), которые стали называться Земельными законами, завершили процесс, начатый аналогичными земельными законами, принятыми в 1913 и 1936 годах; Конечным результатом было выделение более 80 процентов земель Южной Африки для белого меньшинства.Чтобы усилить сегрегацию рас и предотвратить вторжение чернокожих в районы проживания белых, правительство усилило существующие законы о пропусках, которые требовали от небелых иметь документы, разрешающие их присутствие в зонах ограниченного доступа. Другие законы запрещали большинство социальных контактов между расами, разрешали отдельные общественные учреждения, устанавливали отдельные образовательные стандарты, ограничивали каждую расу определенными видами работ, сокращали профсоюзы небелых и запрещали участие небелых (через белых представителей) в национальном правительстве.

Знак эпохи апартеида

Знак эпохи апартеида, часть выставки в Музее апартеида, Йоханнесбург, Южная Африка.

© Dendenal81 / Getty Images

В соответствии с Законом об органах власти банту 1951 года правительство восстановило племенные организации для чернокожих африканцев, а Закон о содействии самоуправлению банту 1959 года создал 10 африканских хоумлендов, или бантустан. В соответствии с Законом о гражданстве хоумлендов банту 1970 года каждый чернокожий южноафриканец, независимо от фактического проживания, стал гражданином одного из бантустанов, тем самым исключив чернокожих из политического тела Южной Африки.Четыре бантустана получили независимость как республики, а остальные имели разную степень самоуправления; но все оставались зависимыми, как политически, так и экономически, от Южной Африки. Однако зависимость южноафриканской экономики от небелой рабочей силы мешала правительству проводить политику раздельного развития.

бантустан

территории бантустана (также известные как черные хоумленды или черные государства) в Южной Африке в эпоху апартеида.

Encyclopædia Britannica, Inc. Изучите историю апартеида в Кейптауне и тюремное заключение повстанцев на острове Роббен, в первую очередь Нельсона Манделу.

Узнайте об истории апартеида в Кейптауне, Южная Африка, и близлежащем острове Роббен. , где были заключены несколько чернокожих активистов, в первую очередь Нельсон Мандела.

Contunico © ZDF Enterprises GmbH, Майнц Посмотреть все видео к этой статье

Хотя правительство имело власть подавлять практически всю критику своей политики, в Южной Африке всегда существовала некоторая оппозиция апартеиду.Группы чернокожих африканцев при поддержке некоторых белых проводили демонстрации и забастовки, и было много случаев насильственных протестов и саботажа. Одна из первых и самых жестоких демонстраций против апартеида прошла в Шарпевиле 21 марта 1960 года; В ответ на действия протестующих полиция открыла огонь, в результате чего было убито около 69 чернокожих африканцев и многие получили ранения. Попытка обеспечить соблюдение требований к языку африкаанс для чернокожих африканских студентов привела к беспорядкам в Соуэто в 1976 году.Некоторые белые политики призвали к ослаблению незначительных ограничений, именуемых «мелким апартеидом», или к установлению расового равенства.

апартеид: последствия смертоносной демонстрации в Шарпевиле

Раненые оказываются под присмотром после того, как полиция открыла огонь по демонстрации против апартеида в Шарпевилле, Южная Африка, 1960.

Central Press / Hulton Archive / Getty Images Получите эксклюзивный доступ к контенту нашего 1768 First Edition с подпиской.Подпишитесь сегодня

Апартеид также получил международное осуждение. Южная Африка была вынуждена выйти из Содружества в 1961 году, когда стало очевидно, что другие страны-члены не примут ее расовую политику. В 1985 году и Великобритания, и США ввели избирательные экономические санкции против Южной Африки. В ответ на это и другие давления правительство Южной Африки отменило законы о пропусках в 1986 году, хотя чернокожим по-прежнему запрещалось жить в определенных для белых районах, а полиции были предоставлены широкие чрезвычайные полномочия.

Тем не менее, в результате более фундаментального изменения политики правительство президента ЮАР Ф. В. де Клерка в 1990–91 отменило большую часть социального законодательства, которое обеспечивало правовую основу апартеида, включая Закон о регистрации населения. Тем не менее систематическая расовая сегрегация оставалась глубоко укоренившейся в южноафриканском обществе и продолжалась на фактической основе. Новая конституция, предоставившая права чернокожим и другим расовым группам, была принята в 1993 году и вступила в силу в 1994 году. Всенародные национальные выборы, также проведенные в 1994 году, привели к созданию коалиционного правительства с черным большинством во главе с активистом против апартеида Нельсоном Манделой, первым чернокожим президентом страны .Эти события ознаменовали конец законодательно закрепленного апартеида, хотя и не закрепили его социально-экономические последствия.

деления ядер | Примеры и процесс

Деление ядра , разделение тяжелого атомного ядра, такого как ядро ​​урана или плутония, на два фрагмента примерно равной массы. Процесс сопровождается выделением большого количества энергии.

При делении ядер ядро ​​атома распадается на два более легких ядра. В некоторых случаях процесс может происходить спонтанно или может быть вызван возбуждением ядра различными частицами (например,g., нейтроны, протоны, дейтроны или альфа-частицы) или с электромагнитным излучением в форме гамма-лучей. В процессе деления выделяется большое количество энергии, образуются радиоактивные продукты и испускается несколько нейтронов. Эти нейтроны могут вызвать деление в соседнем ядре делящегося материала и высвободить больше нейтронов, которые могут повторять последовательность, вызывая цепную реакцию, в которой большое количество ядер подвергается делению и выделяется огромное количество энергии. Если управлять такой цепной реакцией в ядерном реакторе, она может дать энергию на благо общества.Если его не контролировать, как в случае так называемой атомной бомбы, он может привести к взрыву огромной разрушительной силы.

Открытие ядерного деления открыло новую эру - «атомную эру». Потенциал ядерного деления во благо или во зло и соотношение риска и пользы от его применения не только послужили основой для многих социологических, политических, экономических и научных достижений, но также и для серьезных опасений. Даже с чисто научной точки зрения процесс ядерного деления породил множество загадок и сложностей, и полного теоретического объяснения все еще нет.

История исследований и технологий деления

Термин «деление» впервые был использован немецкими физиками Лизе Мейтнер и Отто Фриш в 1939 году для описания распада тяжелого ядра на два более легких ядра примерно одинакового размера. Вывод о том, что такая необычная ядерная реакция может действительно произойти, стал кульминацией поистине драматического эпизода в истории науки и положил начало чрезвычайно интенсивному и продуктивному периоду исследований.

Получите эксклюзивный доступ к контенту нашего 1768 First Edition с подпиской.Подпишитесь сегодня

История открытия ядерного деления фактически началась с открытия нейтрона в 1932 году Джеймсом Чедвиком в Англии. Вскоре после этого Энрико Ферми и его соратники в Италии предприняли обширное исследование ядерных реакций, вызываемых бомбардировкой различных элементов этой незаряженной частицей. В частности, эти исследователи наблюдали (1934), что по крайней мере четыре различных радиоактивных вещества возникли в результате бомбардировки урана медленными нейтронами.Эти недавно обнаруженные виды испускали бета-частицы и считались изотопами нестабильных «трансурановых элементов» с атомными номерами 93, 94 и, возможно, выше. Конечно, был большой интерес к изучению свойств этих элементов, и многие радиохимики принимали участие в исследованиях. Однако результаты этих исследований были чрезвычайно запутанными, и путаница сохранялась до 1939 года, когда Отто Хан и Фриц Штрассманн в Германии, следуя подсказке, предоставленной Ирен Жолио-Кюри и Павлом Савичем во Франции (1938), определенно доказали, что так так называемые трансурановые элементы, на самом деле были радиоизотопами бария, лантана и других элементов в середине периодической таблицы.

То, что более легкие элементы могут быть образованы путем бомбардировки тяжелых ядер нейтронами, предлагалось ранее (в частности, немецким химиком Идой Ноддак в 1934 году), но эта идея не рассматривалась серьезно, поскольку она влекла за собой столь широкий отход от общепринятых взглядов на ядерной физике и не подтверждался четкими химическими доказательствами. Однако, вооруженные однозначными результатами Гана и Штрассмана, Мейтнер и Фриш использовали недавно сформулированную жидкокапельную модель ядра, чтобы дать качественную теоретическую интерпретацию процесса деления, и обратили внимание на большое высвобождение энергии, которое должно сопровождать его.Эта реакция была практически мгновенно подтверждена в десятках лабораторий по всему миру, и в течение года было опубликовано более 100 статей, описывающих большинство важных особенностей процесса. Эти эксперименты подтвердили образование чрезвычайно энергичных тяжелых частиц и расширили возможности химической идентификации продуктов.

Химическое свидетельство, которое так важно для Гана и Штрассмана к открытию ядерного деления, было получено с применением методов носителей и индикаторов.Поскольку образовались невидимые количества радиоактивных частиц, их химическая идентичность должна была быть выведена из того, как они следовали известным элементам-носителям, присутствующим в макроскопических количествах, посредством различных химических операций. Известные радиоактивные виды были также добавлены в качестве индикаторов, и их поведение сравнивалось с поведением неизвестных видов, чтобы помочь в идентификации последних. На протяжении многих лет эти радиохимические методы использовались для выделения и идентификации около 34 элементов от цинка (атомный номер 30) до гадолиния (атомный номер 64), которые образуются в виде продуктов деления.Широкий спектр радиоактивности, возникающей при делении, делает эту реакцию богатым источником индикаторов для химического, биологического и промышленного использования.

Хотя первые эксперименты включали деление обычного урана медленными нейтронами, было быстро установлено, что причиной этого явления является редкий изотоп уран-235. Более распространенный изотоп уран-238 может быть подвергнут делению только быстрыми нейтронами с энергией, превышающей 1 МэВ. Было показано, что ядра других тяжелых элементов, таких как торий и протактиний, способны делиться быстрыми нейтронами; и другие частицы, такие как быстрые протоны, дейтроны и альфа-частицы, вместе с гамма-лучами, оказались эффективными в индукции реакции.

В 1939 году Фредерик Жолио-Кюри, Ханс фон Хальбан и Лью Коварски обнаружили, что при делении урана-235 испускается несколько нейтронов, и это открытие привело к возможности самоподдерживающейся цепной реакции. Ферми и его коллеги осознали огромный потенциал такой реакции, если бы ее можно было контролировать. 2 декабря 1942 года им это удалось, запустив первый в мире ядерный реактор. Это устройство, известное как «свая», состояло из множества урановых и графитовых блоков и было построено на территории кампуса Чикагского университета.

Секретный Манхэттенский проект, учрежденный вскоре после вступления США во Вторую мировую войну, разработал атомную бомбу. Когда война закончилась, были предприняты усилия по разработке новых типов реакторов для крупномасштабной энергетики, что положило начало ядерной энергетике.

Глава 14. Основные функции лидерства | Раздел 7. Построение и поддержание отношений | Основной раздел

Узнайте, как строить отношения, потому что отношения, которые у вас есть с коллегами, сообществом и вашими противниками, идеально подходят для достижения ваших целей.

  • Что такое построение отношений?
  • Почему нам нужно строить и поддерживать отношения?
  • Когда вы строите и поддерживаете отношения?
  • Как вы строите отношения? Программа из 11 шагов
  • Как вы поддерживаете отношения?

Что такое построение отношений?

Отношения являются строительными блоками для всей организационной деятельности сообщества. Если вы хотите организовать волейбольный матч или избавиться от несправедливых жилищных норм в вашем городе, вам понадобятся хорошие отношения. Почему? Потому что отношения, которые у нас есть с нашими коллегами, сообществами, которым мы служим, и даже нашими противниками - это означает для достижения наших целей. Люди не работают изолированно: нам нужно работать вместе! Все наши отношения вместе составляют основу организованных усилий по изменению. Нам нужно, чтобы много людей делилось своими идеями, высказывались и выполняли работу.

Это также человек , которые мотивируют нас на достижение наших целей. Как строители сообществ, мы глубоко заботимся о людях, и забота является частью нашей работы. Наша забота о других побуждает нас работать так же усердно, как и мы. Часто мы постоянно думаем о здоровье и счастье наших детей, соседей и коллег, заставляя себя преодолевать препятствия и преодолевать трудности, которые могут казаться непосильными.

Если вы являетесь официальным лидером или активным гражданином без официального титула, вы будете наиболее эффективны, если вы установите вокруг себя много крепких отношений в сообществе.

В этом разделе мы поговорим о построении и поддержании отношений, а также дадим вам несколько практических советов и общих рекомендаций.

И помните, что : обычные люди постоянно учатся навыкам установления и поддержания отношений. Не нужно быть особенно обаятельным, остроумным или талантливым. Однако, если вы очаровательны, остроумны или талантливы, эти рекомендации могут вам помочь!

Почему нам нужно строить и поддерживать отношения?

Давайте посмотрим на этот пример:

Организация блочной вечеринки

Предположим, вы хотите организовать блочную вечеринку.Какие отношения вам нужны, чтобы это произошло?

Кто поможет вам спланировать вечеринку блока?

Вы же не хотите делать все планирование и работу в одиночку, не так ли? Было бы намного веселее, не говоря уже о том, чтобы легче было поработать с несколькими соседями, чтобы эта вечеринка состоялась.

Как получить одобрение и сотрудничество на местном уровне?

Во многих городах вам необходимо, чтобы городской совет или правительственные группы одобряли разрешения блок-партий.Наличие одного-двух друзей в местном правительстве может помочь вам понять, как преодолеть бюрократические проволочки, чтобы получить разрешение. Если вы никого не знаете, вы можете построить отношения на этом пути.

Кто еще может помочь?

Если у вас уже есть отношения с владельцем продуктового магазина на углу, она может пожертвовать арбуз или напитки для вечеринки. Если вы знаете местных пожарных, они могут принести детям пожарную машину, чтобы они могли взобраться на нее.У тебя есть друг-клоун?

Кто придет на вечеринку блока?

И последнее, но не менее важное: для успешной вечеринки блока вы хотите, чтобы пришло как можно больше людей из вашего блока. Если ваши соседи знают вас или кого-либо еще из комитета по планированию, они с гораздо большей готовностью преодолеют свою застенчивость и появятся.

В целом, чем больше людей вы знаете, тем проще будет организовать вечеринку из блоков и тем веселее будет для всех.

Основные причины для построения отношений:

  • Строительство общины происходит индивидуально . Вам нужно строить отношения с людьми один на один, если вы хотите, чтобы они стали частью вашей группы или организации. Некоторые люди участвуют в организациях, потому что верят в общее дело. Однако многие люди становятся участниками общественной группы или организации только потому, что у них есть отношения с другим человеком, который уже участвует.
  • Нам нужны отношения, чтобы завоевать союзников для нашего дела .Чтобы получить поддержку от людей, не входящих в наши организации, нам необходимо построить отношения, в которых люди знают нас и доверяют нам.
  • Наши отношения придают смысл и богатство нашей работе и нашей жизни . Всем нам нужно сообщество людей, которые разделяют радость и борьбу за организацию и внесение изменений в сообщество. Немного товарищества имеет большое значение.

О каких отношениях идет речь?

Все отношения разные, но все они имеют значение.Если вы каждый день улыбаетесь и здороваетесь со школьным пограничником по дороге на работу, значит, у вас сложились отношения. Этот пограничник может быть тем, кто будет присматривать за вашими детьми или внуками, когда они станут достаточно взрослыми, чтобы идти в школу самостоятельно. Охранник запомнит вас и вашу теплую улыбку, когда будет сопровождать ребенка через улицу. И, возможно, пограничник станет тем, кого вы в конечном итоге наберете, чтобы возглавить комитет по безопасности дорожного движения.

Ваши отношения с охранником на переходе могут сильно отличаться от ваших отношений с людьми, входящими в комитет по уборке парка вашего района.Отношения, которые у вас будут с помощником мэра, с вашим персоналом, с членами вашего совета директоров и с вашим супругом, будут разными, но все они играют важную роль в организации сообщества.

Чем больше у вас отношений, тем лучше. Никогда не знаешь, когда они пригодятся. Член местной банды может быть именно тем человеком, который вам нужен, чтобы помочь вам организовать группу и построить новую игровую площадку в вашем районе. Будь то правительственные чиновники, школьные учителя, бизнесмены, старики, садовники, дети, люди с ограниченными возможностями, бездомные или кто-либо еще - построение дружбы окупится так, как вы, возможно, никогда не ожидали.

Вы в центре

Представьте себе колесо, в центре или в центре которого вы находитесь, и каждая спица представляет собой отношения с другим человеком. Это звучит эгоистично? Так не должно быть. Чтобы удерживать колесо вместе, требуется много спиц, и именно оно помогает продвигать инициативу. В группе достаточно места, чтобы каждый мог создать свое колесо крепких отношений.

Дело в том, что вы должны найти время, чтобы установить и поддерживать отношения.Если вы ждете, пока другие сначала установят с вами отношения, вы можете потратить много времени на ожидание.

Одно напоминание : Нет смысла строить отношения только для того, чтобы заставить людей делать за вас работу. Это не сработает, потому что люди будут чувствовать себя использованными. Строители сообщества честно подходят к отношениям. Мы строим отношения, потому что нам кто-то искренне нравится, потому что у нас есть что предложить этому человеку, или потому, что у нас есть общая цель.

Когда вы строите и поддерживаете отношения?

Вы делаете это все время .Если вы потратите дополнительные пять минут, чтобы спросить человека, который набивает конверты, как он думает, что делает бейсбольная команда в этом году, вы построите более крепкие отношения.

Некоторые отношения требуют больше времени, чем другие. Вы можете встречаться за обедом раз в месяц со всеми другими директорами молодежных организаций в вашем городе. Возможно, вам придется дважды на этой неделе встретиться с сотрудником, который испытывает некоторое недовольство работой. Вы можете время от времени звонить представителю школьного комитета, чтобы узнавать о проблемах, представляющих общий интерес.

Как организаторы сообщества с небольшими ресурсами, мы часто находимся под огромным давлением, которое отвлекает нас от внимания к отношениям. Мы чувствуем необходимость достижения важных целей. Мы ошибочно считаем, что времяпрепровождение в отношениях - это пустяк, от которого человеку становится хорошо, но который не выполняет свою работу. Однако часто отношения являются ключом к решению проблемы или выполнению работы. Построение и поддержание множества прочных, крепких отношений является центральным элементом нашей работы как лидеров сообщества.

Взаимоотношения - основа

Часто построение отношений - это фундамент, который необходимо заложить, прежде чем что-либо еще будет сделано в проекте. Чем масштабнее проект, тем больше отношений вам понадобится в качестве основы.

Например, если вы организуете коалицию общественных групп, которые будут работать над созданием центра мультикультурного искусства, было бы неплохо познакомиться с людьми в каждой организации, прежде чем пытаться собрать их вместе для работы над проектом.

Спросите себя: «Вас больше убедил кто-то, кого вы знаете, или совершенно незнакомый человек?» Тогда руководствуйтесь собственным ответом.

Когда вы планируете проект, вы должны включить в план время, необходимое для построения взаимоотношений. Людям нужно время, чтобы завоевать доверие. Когда люди работают вместе, у них должны быть доверительные отношения. Когда доверие отсутствует, людям обычно трудно работать вместе. Они беспокоятся о том, чтобы слишком много рисковать. Кажется, что разногласия возникают без всякой важной причины.Вложение времени, ресурсов и репутации организации может быть рискованным. По крайней мере, люди хотят получить отдачу от своих вложений. Они должны чувствовать, что вы знаете их как личность, понимаете их интересы и не подведете их.

Вернемся к примеру с центром мультикультурного искусства - если в его создании будет задействовано несколько общественных групп, и если вы их недостаточно хорошо знаете (и они не знают друг друга), сначала начните вместе работать над меньшим проектом. Например, вы можете совместно спонсировать вечер культурного обмена.Если вечер удачен, вы обретете некоторое общее доверие и уверенность, на которых можно будет строить. Вы можете запланировать несколько подобных мероприятий, которые укрепят доверие в течение определенного периода времени.

Если что-то не получается, вернитесь назад и попробуйте более легкую задачу. Если вы начинаете обсуждать центр мультикультурного искусства, а люди проявляют признаки опасения, а не волнения, замедлите процесс. Примите более легкий вызов, пока не наладятся прочные отношения.

Налаживайте отношения до того, как они вам понадобятся

Всегда лучше строить отношения до того, как вам понадобится, или до того, как возникнет конфликт.Если у вас уже есть хорошие отношения с владельцем продуктового магазина в вашем районе, вы будете в лучшем положении, чтобы помочь разрешить рискованный конфликт между ним и некоторыми соседскими подростками. Если вы уже установили отношения с представителем школьного комитета, она, возможно, с большей готовностью откликнется на ваше мнение о финансировании специального образования.

Налаживание отношений в условиях кризиса

Невозможно установить отношения во время кризиса, и часто кризис может сблизить людей.Хотя это может показаться необычным, максимально используйте кризисы вашей организации. Звоните о помощи, и люди откликнутся на зов. Вы можете строить отношения, когда в этом есть нужды, потому что люди часто хотят помочь.

Как вы строите отношения? Программа из 11 шагов

Вот несколько советов, как наладить отношения с землей. Некоторые из этих идей мы усвоили в первом классе, но, став взрослыми, мы иногда забываем.

  1. Постройте отношения по одному .К счастью или к сожалению, коротких путей нет. Рассылка информационного бюллетеня помогает вам оставаться на связи со многими людьми, но это не заменяет знакомства с реальным человеком.
  2. Будьте дружелюбны и установите связь . Это может показаться самоочевидным, но дружеское слово или улыбка могут улучшить чей-то день. Попробуйте найти что-то общее: все мы хотим иметь тесные связи с другими людьми.
  3. Задавайте вопросы людям . Люди любят говорить о себе и о том, что они думают.Если вы спросите людей о себе, а затем уделите время тому, чтобы внимательно их выслушать, они могут стать вашим верным другом.
  4. Расскажите о себе . Люди не будут доверять вам, если вы не захотите им доверять. Расскажите им, что вас действительно волнует и что вы думаете.
  5. Иди и делай дела . На вопрос, почему он грабил банки, грабитель ответил: «Потому что там деньги». Если вы хотите подружиться, вы должны идти туда, где есть люди: на пикники, конференции, мероприятия, сборы средств, вечеринки, детские площадки, боулинг, игры в малой лиге, распродажи выпечки и т. Д..
  6. Принимайте людей такими, какие они есть . Необязательно все время соглашаться с ними, чтобы наладить с ними отношения. Никто не любит, когда его судят.
  7. Предположим, что другие люди тоже хотят наладить отношения . Под самым раздражительным человеком часто скрывается одинокая душа, надеющаяся, что кто-то расколется в их скорлупе.
  8. Преодолей страх отказа . Большинство из нас страдает страхом быть отвергнутым, и с этим можно только одно: преодолеть это.Если вы хотите наладить отношения, планируйте время от времени получать отказ. В остальное время вы будете щедро вознаграждены новыми отношениями, которые вы установили.
  9. Будьте настойчивы . Люди часто бывают застенчивыми и подозрительными. Чтобы завоевать доверие, нужно время. Вы почти всегда можете построить отношения, если будете их придерживаться.
  10. Пригласите людей принять участие . Люди хотят стать частью чего-то большего, чем они сами. Многие люди ищут возможность познакомиться с людьми, разделяющими общие цели.В худшем случае люди будут польщены, что вы пригласили их присоединиться.
  11. Наслаждайтесь людьми . Если вы искренне наслаждаетесь людьми, других будет привлекать ваше отношение. Люди с большей вероятностью захотят быть рядом с вами.

Как вы строите отношения с людьми другой культуры, чем ваша собственная?

Вот несколько руководств здравого смысла:

  • Узнайте о культуре человека . Любое усилие будет иметь большое значение для демонстрации того, что вы достаточно заботитесь о реальности жизни другого человека.
  • Поставьте себя в центр культуры другого человека . Особенно, если вы знакомитесь с кем-то, кто не принадлежит к культуре большинства, постарайтесь посетить их культурные мероприятия, где вы являетесь меньшинством. Если вы готовы пойти на риск и поставить себя в ситуацию, в которой вы можете почувствовать дискомфорт, люди будут более склонны хотеть узнать вас поближе.
  • Встаньте против угнетения человека . Действия значат больше, чем слова. Людям, которые подвергаются угнетению, нужны союзники, чтобы выступить против несправедливости.Крепкие отношения возникают, когда люди мужественно действуют друг за друга.
  • Ошибки - это нормально . Возможно, вам придется совершать ошибки, когда вы строите отношения с людьми, чья культура отличается от вашей, но люди, как правило, снисходительны, особенно если у вас хорошие намерения. Помните, держитесь там, даже если вы чувствуете себя отвергнутым.

Как вы строите отношения с людьми, которые занимают политические должности?

Вот несколько рекомендаций по установлению отношений с выборными должностными лицами, лидерами бизнеса и главами крупных организаций.

  • Не бойтесь . Люди, обладающие титулами или политическими властями, тоже люди. Им нравится строить отношения, как и всем остальным.
  • Слушай и воздерживайся от суждений . Люди с титулами редко получают возможность быть услышанными. У них редко появляется возможность обдумать вопрос, пока кто-то не заставит их проголосовать так или иначе. Один из способов подружиться с таким человеком - найти время, чтобы выслушать его. Посмотрите, что вы можете им предложить, не только в политическом контексте, но как сочувствующий человек.

Как вы поддерживаете отношения?

Хорошо, теперь вы наладили отношения. Отношениям, как и любому другому живому существу, нужна забота, чтобы поддерживать их жизнь и здоровье. Итак, что вы с ними делаете, чтобы они продолжали работать?

  • Обратите внимание на людей . Связывайтесь с людьми, когда вам нужно. Это может занять всего несколько минут в неделю, но эти несколько минут могут иметь значение, помогая вашему другу или коллеге вспомнить о важности совместной работы.
  • Общайтесь открыто . Людям нужно общаться. Хорошая идея - выделить немного времени, чтобы просто поговорить о том, как идут дела. Когда у людей нет возможности поговорить о важных вопросах, могут возникать недопонимания и накапливаться напряженность. Общение - это дисциплина, которую нужно практиковать регулярно; это как принимать витамины или делать отжимания.
  • Цените друг друга . Чтобы отношения продолжались, каждого нужно ценить.Если вы заметили, что кто-то проделал звездную работу по сбору необходимых данных для комитета, скажите об этом. Если вам нравится работать с кем-то, дайте ему знать. Мы все люди, и признательность помогает нам процветать.
  • Расширься . Отойдите немного в сторону, хотя бы время от времени. Если вашему коллеге нужно провести дополнительное время со своей дочерью, вы можете попросить его пойти домой пораньше, и вы завершите заявку на грант.
  • Вызовитесь добровольцем поработать в своей организации (если их еще нет в вашей).Если вы протянете им руку помощи, они, вероятно, будут хорошо думать о вас и что-то дадут взамен.
  • Бросьте вызов друг другу, чтобы стать лучше . Всем нам нужен приятель, который поможет нам выйти за рамки того, что, как мы думаем, мы можем сделать. Мы также можем укрепить отношения, побуждая наших партнеров по работе решать более серьезные задачи.
  • Поддерживайте друг друга, когда становится сложно . Верность важна для поддержания здоровых отношений. Мы можем не соглашаться с коллегой или другом, но мы можем поддержать его или ее, когда они в затруднительном положении.

Когда отношения становятся беспорядочными

Многие отношения рано или поздно становятся беспорядочными, и это не обязательно плохо. На самом деле, иногда людям нужно хорошенько подраться или очистить воздух, чтобы вернуть отношения в нужное русло. Конфликт не означает, что отношениям нужно положить конец. Помните: мы часто ссоримся с людьми, о которых мы больше всего заботимся и с которыми разделяем наши самые большие надежды.

Вот несколько идей, которые могут пригодиться, когда станет сложно:

  • Найдите время, чтобы послушать друг друга .Это не всегда легко. Каждому нужно время, чтобы послушать, не перебивая, пока собеседник говорит.
  • Поставьте себя на место другого человека . У каждого в конфликте совершенно разные взгляды на ситуацию. В разгар драки люди обычно убеждены, что они абсолютно правы. Попытайтесь понять, почему другой человек видит вещи так, как они. Просто ваша попытка поможет другому человеку увидеть, что вы пытаетесь.
  • Посмотрите, что правда в том, что говорит другой человек. Посмотри, сможешь ли ты исправить ситуацию. Если вам нужно извиниться, продолжайте. Это может показаться ужасным, но извинения часто могут помочь отношениям вернуться на правильный путь.
  • Отделить эмоции от реальности . У каждого есть эмоции, которые периодически всплывают на поверхность. Люди часто говорят вещи, которые не имеют в виду, когда они находятся в эпицентре эмоционального расстройства. Предоставьте людям время и пространство, чтобы они могли почувствовать свои эмоции, прежде чем пытаться уладить ситуацию.
  • Продолжайте ценить и уважать друг друга .Даже если это может быть сложно, сосредоточьтесь на положительных аспектах отношений. Если вы моделируете признательность, другой человек часто последует за вами.
  • Говорите от всего сердца . Пытаясь решить эту проблему, сосредоточьтесь на том, что вас и собеседника волнует больше всего: целях проекта, друг друга, сообщества и т. Д.
  • Не отказывайтесь от своих принципов . Не жертвуйте тем, во что вы верите, только ради того, чтобы отношения работали. Если вы откажетесь от своих принципов, вы не добьетесь успеха, и отношения все равно не сложатся.
  • Держитесь там, когда становится сложно . Вы можете взять передышку, но постарайтесь полностью не отказываться от отношений. Когда дела идут тяжело, нужно извлечь важные уроки. Лучше всего поддерживать отношения, в которые вы вложили свое время и заботу?
  • Вы можете действовать независимо, чтобы улучшить любые отношения . Даже если другой человек или группа людей ведет себя плохо, вы можете действовать позитивно, уважительно, конструктивно и вдумчиво.Это может удивить людей, и они могут последовать вашему примеру.

Легче сказать, чем сделать? Да. Управлять отношениями может быть сложно, но возможно. Представьте себя исследователем, прокладывающим свой путь в таинственных и мутных водах отношений. Впереди сокровище!

Взаимоотношения с противниками

Да, вы даже можете иметь отношения с людьми, которые не согласны с вами и которые могут даже работать против вас и целей вашей организации.Вы можете использовать те же правила, которые перечислены в разделе «Когда отношения становятся беспорядочными» выше, с этими дополнениями:

  • Вы можете не соглашаться и по-прежнему строить отношения с людьми, которые работают против ваших целей. Если вы это сделаете, члены другого лагеря начнут видеть в вас человека, а не врага. В свою очередь, вы также получите представление об их человечности. Вы можете попробовать пригласить кого-нибудь из «другого» лагеря на обед и выяснить, что у вас общего.
  • Вы можете создать группу диалога, чтобы узнать, почему противники видят проблемы именно так, как они. Вы можете нанять нейтрального фасилитатора, который будет вести обсуждение вопросов, по которым возникают разногласия. С опытным фасилитатором люди могут начать понимать ценности и заботу, которые другие привносят в свое мнение, и находить области, представляющие общий интерес.

Резюме

Построение и поддержание отношений лежат в основе организации сообществ. Сила сообщества заключается в прочности наших связей друг с другом.Обладая прочными связями, люди могут внести реальные изменения. Создание этих связей требует времени; Но оно того стоит.

Отношения часто являются источником наших величайших радостей и самых серьезных проблем. Разобраться в отношениях - непростая задача. Люди настолько уникальны и сложны, что нет простой формулы.

В основе почти каждой религии лежит идея о том, что мы должны относиться к своим ближним так, как мы хотели бы, чтобы относились к нам. Если вы будете помнить об этом, вам, скорее всего, удастся построить отношения, на которые можно положиться.

Независимо от того, являетесь ли вы «лидером» или последователем, у вас есть возможность создать вокруг себя сообщество друзей, коллег, соратников, союзников, партнеров и приятелей. Вместе невозможно сказать, что вы можете сделать.

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *